SPS琼脂原理和使用方法

一、试验原理：

培养基用于产气荚膜梭菌的平板计数（GB标准）。培养中的胰酪蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；亚硫酸钠和柠檬酸铁用于检测硫化氢的产生，产气荚膜梭菌可还原亚硫酸盐为硫化物，硫化物与铁反应生成黑色硫化铁，使菌落中心呈黑色；琼脂是培养基的凝固剂；多粘菌素B和磺胺嘧啶钠抑制非梭菌的细菌。

二、培养基配方（g/L）：

三、试验方法：

1）加热溶解以上各组分，待冷却后调节pH至7.0±0.1（25℃），分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，却至50℃时，每100ml培养基加入1支多粘菌素B硫酸盐溶液(1.2mg)和1支磺胺嘧啶钠溶液(12mg)，混匀，倾入无菌平皿，备用。

2）采用滤膜法，取50mL的水样用孔径为0.45μm的滤膜过滤，然后将滤膜移至SPS琼脂培养基上，倒置于36℃±1℃厌氧培养24h，计数黑色菌落。

四、试验结果判断：

产气荚膜梭菌在滤膜上的单菌落呈黑色，任意挑取3个至5个在滤膜上生长的黑色菌落，分别接种FT培养基，于36℃±1℃厌氧培养18h-24h后，将培养物做确证试验，根据试验结果确证产气荚膜梭菌的存在。

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