一、试验原理:
用于霍乱弧菌的分离培养。
蛋白胨、牛肉膏粉提供氮源、维生素和矿物质;蔗糖提供碳源;亚硫酸钠可刺激弧菌生长;氯化钠维持均衡的渗透压,既能满足弧菌嗜盐生长的要求,同时其形成的高渗透压,使其他一些细菌很难生长。庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;同时枸橼酸钠可使霍乱弧菌免受其他抑菌剂的作用。霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
亚硫酸钠 |
3.0 |
氯化钠 |
5.0 |
枸橼酸钠 |
10.0 |
蔗糖 |
10.0 |
庆大霉素 |
250 IU |
琼脂 |
15.0 |
pH8.3-8.7 25℃ |
三、实验方法:
1.此培养基中含有蔗糖,不宜高温灭菌,称取本品56.0g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,冷至50℃左右时,加入1%亚碲酸钾溶液0.5mL,混匀,倾入无菌平皿,备用。
2.将质控菌液划线接种于平板。
3.36±1℃需氧培养18小时,记录实验结果。
四、结果观察
接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃恒温培养箱中需氧培养14h-18h。
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其它特征 |
霍乱弧菌(海水) |
/ |
+++ |
菌落扁平湿润,中心黑色,直径2mm-3mm |
非01群霍乱弧菌 |
/ |
+++ |
菌落扁平湿润,中心黑色,直径2mm-3mm |
副溶血性弧菌 |
ATCC 17802 |
+/- |
菌落小于1mm |
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
+/- |
菌落针尖大小 |
大肠杆菌 |
ATCC 25922 |
- |
/ |
图1 庆大霉素琼脂培养基微生物质控结果
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