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伊红美蓝琼脂原理和使用方法

张辉
录入时间:2018-7-23 11:34:48 来源：青岛海博生物

一、试验原理：

本培养基主是一种鉴别肠道杆菌和大肠埃希氏菌的选择性培养基。蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和生长因子等营养物质；乳糖为可发酵的碳水化合物；磷酸氢二钾作为培养基pH缓冲剂；琼脂是培养基的凝固剂；伊红和美蓝作为鉴别指示剂，抑制革兰氏阳性菌的生长。大肠菌群为乳糖发酵细菌，可形成蓝黑色菌落；沙门氏菌和志贺氏菌为乳糖不发酵微生物，形成无色、透明或琥珀色的菌落；不致病的、乳酸不发酵的革兰氏阴性细菌也会在培养基上生长，需通过额外的生化试验进行区分。

二、培养基配方（g/L）：

蛋白胨	10.0
乳糖	10.0
磷酸氢二钾	2.0
伊红	0.4
美蓝	0.065
琼脂	15.0
pH 7.1±0.2 25℃

三、试验方法：

称取本品干粉37.4 g，加入1.0 L蒸馏水或去离子水中，搅拌加热煮沸至完全溶解，121℃高压灭菌15 min，备用。

四、结果观察与解释

接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养24-48小时。

注：回收率计算时，用TSA做对照培养基。

质控菌株	菌株编号	接种量(CFU)	回收率	生长状况	其它特征
大肠埃希氏菌	ATCC 25922	10-100	≥70%	+++	有金属光泽，黑色菌落
大肠埃希氏菌	ATCC 8739	10-100	≥70%	+++	有金属光泽，黑色菌落
金黄色葡萄球菌	ATCC 6538	100-1000	/	-	抑制
鼠伤寒沙门氏菌	ATCC 14028	10-100	≥70%	+++	无色透明菌落

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