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伊红美蓝琼脂原理和使用方法

张辉
录入时间:2018-7-23 11:34:48 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

    本培养基主是一种鉴别肠道杆菌和大肠埃希氏菌的选择性培养基。蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和生长因子等营养物质;乳糖为可发酵的碳水化合物;磷酸氢二钾作为培养基pH缓冲剂;琼脂是培养基的凝固剂;伊红和美蓝作为鉴别指示剂,抑制革兰氏阳性菌的生长。大肠菌群为乳糖发酵细菌,可形成蓝黑色菌落;沙门氏菌和志贺氏菌为乳糖不发酵微生物,形成无色、透明或琥珀色的菌落;不致病的、乳酸不发酵的革兰氏阴性细菌也会在培养基上生长,需通过额外的生化试验进行区分。

二、培养基配方(g/L):

蛋白胨 

10.0

乳糖

10.0

磷酸氢二钾

2.0

伊红

0.4

美蓝

0.065

琼脂

15.0

pH 7.1±0.2    25℃

三、试验方法:

    称取本品干粉37.4 g,加入1.0 L蒸馏水或去离子水中,搅拌加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15 min,备用。

四、结果观察与解释 

    接种以下质控菌株,放置30-35℃需氧培养24-48小时。

    注:回收率计算时,用TSA做对照培养基。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

回收率

生长状况

其它特征

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

10-100

≥70%

+++

有金属光泽,黑色菌落

大肠埃希氏菌

ATCC 8739

10-100

≥70%

+++

有金属光泽,黑色菌落

金黄色葡萄球菌

ATCC 6538

100-1000

/

-

抑制

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

10-100

≥70%

+++

无色透明菌落


 

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