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HE琼脂原理和使用方法

张辉
录入时间:2018-9-27 16:40:53 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

本培养基用于食品微生物检验中沙门氏菌的选择性培养。

蛋白胨、牛肉浸粉在培养基中作为基础营养物质,为细菌的生长提供所需的碳源、氮源、维生素以及一些矿物质等元素;氯化钠维持体系渗透压平衡;胆盐主要抑制革兰氏阳性菌的生长。培养基中蔗糖、水杨素、乳糖作为鉴别系统,溴麝香草酚蓝和酸性复红作为酸碱指示剂,能把发酵糖类和不发酵糖类的细菌区别开来,前者为橘黄色菌落,后者为淡蓝色菌落。柠檬酸铁铵及硫代硫酸钠分别作为产硫化氢的指示剂和底物,能产硫化氢但不发酵糖类的沙门氏菌的菌落边缘呈无色半透明,中心呈黑色。

二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

12.0

牛肉浸粉

3.0

三号胆盐

9.0

乳糖

12.0

蔗糖

12.0

水杨苷

2.0

氯化钠

5.0

溴麝香草酚兰

0.065

硫代硫酸钠

5.0

柠檬酸铁铵

1.5

酸性品红

0.1

琼脂

14.0

pH 7.5±0.2    25℃

三、试验方法:

称取本品75.6g,溶解于1000mL蒸馏水中,煮沸不要超过1分钟冷至50℃时,倾入无菌平皿,在24小时内使用。注意保持培养基表面干燥。

四、结果观察与解释 

接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控结果

其他特征

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

蓝绿色菌落,黑色中心

福氏志贺氏菌

CMCC(B) 51572

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

蓝绿色菌落

伤寒沙门氏菌

CMCC(B) 50071

20-200

TSA

定量

PR≥0.5

蓝绿色菌落,黑色中心

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

/

/

半定量

G<5

橙红色菌落,有胆酸沉淀

粪肠球菌

ATCC 29212

/

/

半定量

G≤1

/

 

图A:鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028  图B:伤寒沙门氏菌CMCC(B) 50071

图C:大肠埃希氏菌ATCC 25922    图D:粪肠球菌ATCC 29212

五、注意事项

1.培养基不可高压灭菌,加热会导致培养基中的组分遭到破坏。

2.变形杆菌属细菌在该培养基上生长的形态可能与沙门氏菌或志贺氏菌相似,因此需要进一步试验后才能判定结果。

3.在该培养基上,大肠菌群菌落周围有明显的胆酸盐沉淀。

 

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