硝酸盐肉汤（军团菌）生化管的使用原理及方法

实验原理：

  硝酸盐培养基中的硝酸盐可被某些细菌还原为亚硝酸盐，加入对氨基苯磺酸和α-萘胺试剂，可与亚硝酸盐反应，产生一种红色重氮化合物而呈阳性；硝酸盐还原的最终产物也因细菌种类不同而不同，包括亚硝酸盐、氨、分子氮和一氧化碳等。若加入对氨基苯磺酸和α-萘胺试剂后不变色，再加入少许锌粉，如果变红，说明培养基中的硝酸盐未被细菌还原而仍然存在，被锌粉还原为亚硝酸盐后与对氨基苯磺酸和α-萘胺试剂反应显红色，则判定为硝酸盐还原阴性；如果加入锌粉后仍然不变红，说明培养基中的硝酸盐已被还原成亚硝酸盐，进而分解成氨、氮等产物，判定为硝酸盐还原阳性。

实验方法：

1.用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈，掰开待用；

2.将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法，制备成5 McFarland浊度（约10⁹CFU/ml）的菌悬液；

3. 吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至生化管中，36±1℃培养24-120h后，观察试验结果。

结果判定：

图1-1  硝酸盐肉汤（还原）质控结果

备注：a:博兹曼军团菌，b:大肠埃希氏菌，c:空白

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