一、培养基原理及用途
此培养基常用李斯特氏菌的选择性增菌培养。
培养基中的蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供基本营养;磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为缓冲剂,维持培养基PH的相对稳定;萘啶酮酸、盐酸丫啶黄、氯化锂为选择性抑菌剂,可抑制大多数革兰氏阴性菌和部分革兰氏阳性菌的生长;含量较高的氯化钠可维持李斯特氏菌的渗透压,并抑制不耐盐细菌的生长;七叶苷、柠檬酸铁铵为指示剂。
李斯特氏菌可在此培养基中生长,并水解七叶苷,使培养基失去荧光;水解七叶苷生成的七叶素与柠檬酸铁铵反应生成黑色物质,可使培养基呈黑色。多数非目标菌受到抑制,在此培养基中生长差,或生长后不分解七叶苷,无变黑、荧光消失现象。
二、成分(g/L)
胰酪蛋白胨.................5.0
蛋白胨.........................5.0
牛肉粉.........................5.0
酵母粉.........................5.0
氯化钠........................20.0
磷酸氢二钠................12.0
磷酸二氢钾................1.35
氯化锂........................3.0
七叶苷........................1.0
萘啶酮酸....................0.002
盐酸丫啶黄................0.0024
柠檬酸铁铵................0.5
PH:7.2±0.2
三、质控方法及实验现象
接种10-100CFU的单增李斯特氏菌、英诺克李斯特氏菌,1000-5000CFU的粪肠球菌、大肠埃希氏菌,置于35℃培养48h,在自然光和紫外灯下观察结果。
备注:左1、左2分别为单增李斯特氏菌、英诺克李斯特氏菌
左3、左4分别为大肠埃希氏菌、粪肠球菌
实验现象说明:单增李斯特氏菌、英诺克李斯特氏菌可在此培养基生长良好,并水解七叶苷使培养基变黑(左侧照片),并在紫外灯下失去荧光(右侧照片)。大肠埃希氏菌、粪肠球菌在此培养基中生长受到抑制,培养基不浑浊,荧光不消失。
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