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月桂基硫酸盐蛋白胨MUG培养基的原理及实验现象

王娟  
录入时间:2018-11-20 13:52:27 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  本培养基用于大肠杆菌的O157:H7的测定(SN/T0973-2000)。

  胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;月桂基硫酸钠可抑制非大肠菌群细菌的生长。大肠埃希氏菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β- D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮 在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶;而致病性大肠杆菌(包括O157:H7)不具有葡萄糖醛酸苷酶,因而不会产生荧光。

二、培养基配方(g/L):

胰蛋白胨

20.0

氯化钠

5.0

乳糖

5.0

磷酸氢二钾

2.75

磷酸二氢钾

2.75

月桂基硫酸钠

0.1

pH 6.8±0.2  25℃

三、操作步骤:

  1、制备质控菌液。

  2、把质控菌液加入试管中。

  3、在36±1℃培养24小时,记录实验结果。

四、微生物试验结果:

接种以下质控菌株,在36±1℃培养18-24小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC25922

>5000

+++

产气,有荧光

大肠埃希氏菌0157

ATCC35150

>5000

+++

产气,无荧光

伤寒沙门氏菌

ATCC14028

>5000

+++

不产气,无荧光

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

>5000

+++

抑制

 

图1-2  月桂基硫酸盐蛋白胨MUG培养基微生物质控结果

备注:A:正常情况下拍摄,B:366nm紫外灯下拍摄;

a:大肠埃希氏菌O157,b: 大肠埃希氏菌,c: 伤寒沙门氏菌,d:金黄色葡萄球菌,e:空白对照


五、方法的局限性

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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