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WS琼脂原理及实验现象

赵宇
录入时间:2018-11-26 9:18:22 来源:青岛海博生物

一、实验原理:

用于沙门氏菌的选择性分离培养

月示蛋白胨、牛肉膏提供碳源、氮源、维生素和矿物质;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;氯化钠维持均衡的渗透压;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂;溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈橙黄色,不发酵糖的菌落为蓝绿色。

二、培养基配方(g/L):

月示蛋白胨

12.0

牛肉膏

3.0

氯化钠

5.0

乳糖

12.0

蔗糖

12.0

十二烷基硫酸钠

2.0

酸性复红

0.1

溴麝香草酚蓝

0.064

硫代硫酸钠

6.8

柠檬酸铁铵

0.8

琼脂

12.0

三、操作步骤

使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

1、制备质控菌液。

2、目标菌选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

3、非目标菌用1μL接种环取质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

4、36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。

接种以下质控菌株,在36±1℃需氧培养18-24小时:

控菌株

菌株编号

其他特征

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC14028

蓝绿色菌落有黑色中心

肠炎沙门氏菌

CMCC(B)50760

蓝绿色菌落有黑色中心

大肠埃希氏菌

ATCC25922

黄色菌落有胆盐沉淀环

金黄色葡萄球菌

ATCC6238

抑制

普通变形杆菌

ATCC13355

黄色菌落有黑色中心

 

  

图1-2  WS琼脂微生物质控结果

备注:a: 肠炎沙门氏菌,b:鼠伤寒沙门氏菌,c: 大肠埃希氏菌,d;普通变形杆菌,e金黄色葡萄球菌

方法的局限性

本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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