一、试验原理:
用于真菌(特别是酵母菌)的计数和分离培养。
麦芽浸粉,特殊蛋白胨和糊精提供氮源,维生素,生长因子;氯化铵提供氮源;麦芽糖提供碳源;磷酸二氢钾作为缓冲剂;甘油提供能源;琼脂是凝固剂。
操作步骤灭菌后,25℃时,该培养基pH值应为5.0±0.2
二、培养基配方(g/L):
麦芽浸粉 |
15.0 |
特殊蛋白胨 |
0.75 |
麦芽糖 |
12.75 |
糊精 |
2.75 |
磷酸二氢钾 |
0.4 |
氯化铵 |
1.0 |
琼脂 |
17.0 |
pH |
5.0±0.2 |
三、试验方法:
粉体装培养基的使用:
1.称取本品49.65g,另取甘油2.35g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。
2.必须满足的试验条件:pH值为5.0±0.2
3.制备质控菌液。
4.选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。
5.在20-25℃培养48-72小时,记录实验结果
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,放置20-25℃需氧培养48-72小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
结果 |
白色念珠菌 |
ATCC10231 |
20-200 |
PR≥0.7 |
白色菌落 |
黑曲霉菌 |
ATCC16404 |
20-200 |
PR≥0.7 |
有黑色孢子 |
酵母菌 |
ATCC18790 |
20-200 |
PR≥0.7 |
白色菌落 |
图1-1 WORT琼脂微生物质控结果
备注:a:酵母菌,b:黑曲霉菌,c: 白色念珠菌,d:空白对照
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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