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KF链球菌琼脂原理和使用方法

赵宇
录入时间:2019-1-9 9:45:34 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  用于粪链球菌的选择型分离培养及计数.

  䏡蛋白胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;麦芽糖和乳糖为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;叠氮钠可抑制革兰氏阴性菌;琼脂是培养基的凝固剂;溴甲酚紫为指示剂染料;粪链球菌能将TTC(氯化三苯基四氮唑)还原成一种酸性的偶氮染料,显示为深红色菌落。

二、培养基配方(g/L):

  月示蛋白胨

10.0

  酵母粉

10.0

  甘油磷酸钠

10.0

  氯化钠

5.0

  麦芽糖

20.0

  乳糖

1.0

  叠氮钠

0.4

  琼脂

13.0

  溴甲酚紫

0.015

  pH 7.2±0.2

25℃ 

三、试验方法:

  粉体装培养基的使用:

  1.称取本品69.4g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸至完全溶解,冷却至50-60℃时,加入无菌1%TTC溶液10ml,混匀,倾入无菌平皿,备用.。

  2.使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

  3.制备质控菌液。

  4.培养基冷却至46±1℃左右时,倾入含1ml质控菌液的无菌平皿中,约15ml培养基,混匀,凝固。

  5.36±1℃倒置培养基培养48±2小时,记录实验结果

四、结果观察与解释 

  接种以下质控菌株,36±1℃倒置培养基培养48±2小时:


质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

质控评定标准

结果

金黄色葡萄球菌

ATCC6538

/

G≤1

/

大肠埃希氏菌

ATCC25922

/

G≤1

/

肠球菌

/

20-200

PR≥0.7

红色菌落

粪肠球菌

ATCc29212

20-200

PR≥0.7

红色菌落

 

图1-2  KF链球菌琼脂质控结果

备注:a:金黄色葡萄球菌,b:大肠埃希氏菌,c:肠球菌,d:粪肠球菌

五、注意事项

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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