一、试验原理：
用于革兰氏阳性球菌的分离培养。
特殊蛋白胨和可溶性淀粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；氯化钠能维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；羊血可以支持生长要求比较苛刻的微生物生长，并可以检测溶血反应，需要注意的是本培养基具有较高的碳水化合物含量，因此β-溶血性链球菌可产生绿溶血反应，可能被误认为是α溶血；另外多粘菌素E破坏革兰氏阴性菌的细胞壁，而萘啶酮酸可以阻碍革兰氏阴性菌的DNA复制从而达到对革兰氏阴性菌的抑制作用。
二、培养基配方（g/L）：
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特殊蛋白胨 |
23.0 |
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可溶性淀粉 |
1.0 |
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氯化钠 |
5.0 |
|
琼脂 |
12.0 |
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萘啶酮酸 |
0.015 |
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多粘菌素E |
0.01 |
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pH 7.3±0.2 25℃ |
|
三、试验方法：
1、称取本品41.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，冷却至50℃左右时，加入5%无菌脱纤维羊血，混匀，倾入无菌平皿，备用。
2、使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。
3、制备质控菌液。
4、将质控菌液划线接种于待测培养基上。
5、36±1℃倒置培养基培养18-24小时，记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
质控评定标准 |
其他特征 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
/ |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
γ溶血环 |
/ |
|
溶血链球菌 |
ATCC32110 |
/ |
β溶血环 |
/ |
|
表皮葡萄球菌 |
CMCC(B)29069 |
/ |
γ溶血环 |
/ |
|
化脓性链球菌 |
ATCC19615 |
/ |
β溶血环 |
/ |
图1-2 哥伦比亚CNA琼脂基础微生物质控结果
备注：a：大肠埃希氏菌，b: 金黄色葡萄球菌，c: 溶血链球菌，d:表皮葡萄球菌，e：化脓链球菌
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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