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改良Y培养基原理和使用方法

丁鑫鑫
录入时间:2019-2-11 8:53:32 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌。

  蛋白胨和水解酪蛋白提供氮源和微量元素;乳糖是可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压,去氧胆酸钠和三号胆盐抑制革兰氏阳性菌;丙酮酸钠刺激目标菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。

二、培养基配方(g/L):

  蛋白胨

15.0

  氯化钠

5.0

  乳糖

10.0

  草酸钠

2.0

  去氧胆酸钠

6.0

  三号胆盐

5.0

  丙酮酸钠

2.0

  孟加拉红

0.04

  水解酪蛋白

5.0

  琼脂

17.0

  pH(25℃)

pH 7.4±0.1

三、试验方法:

  粉体装培养基的使用:

  1.称取本品67.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟。冷却至50℃左右时,倾入无菌平皿。

  2.使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

  3.制备质控菌液。

  4.选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

  5. 用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

  6. 26±1℃倒置培养基培养48±2小时,记录实验结果。

四、结果观察与解释 

  接种以下质控菌株,26±1℃倒置培养基培养48±2小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

质控评定标准

结果

金黄色葡萄球菌

ATCC6538

/

G≤1

/

大肠埃希氏菌

ATCC25922

/

-

粉红色菌落

小肠结肠炎耶尔森氏菌

CMCC(B)52204

20-200

PR≥0.5

无色透明不粘稠菌落

 


图1-2  改良Y培养基微生物质控结果

备注:a:小肠结肠炎耶尔森氏菌,b:大肠埃希氏菌,c:金黄色葡萄球菌

五、注意事项

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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