动力-硝酸盐培养基生化管的实验原理及方法

一、实验原理：

 蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、矿物质；硝酸钾被某些细菌还原为亚硝酸盐，如大肠埃希菌；有的细菌则可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵；有的细菌能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮，如假单胞菌等。硝酸盐还原试验是测定还原过程中所产生的亚硝酸。亚硝酸盐与醋酸作用，生成亚硝酸，亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者与α-萘胺结合生成N-α萘胺偶苯磺酸。做此试验时，应以一支未接种细菌的培养基做对照试验，只有对照管阴性时，才能判定。结果判定:出现红色为阳性反应。如欲检查培养基中硝酸盐是否被分解，可取锌粉少许加入培养基内，如出现红色表明硝酸盐仍存在;若不出现红色，表示硝酸盐已被分解。较少量的琼脂作为培养基的凝固剂。

二、试验方法：

 取新鲜质控菌株斜面，用接种针挑取菌苔穿刺接种至生化管中，36±1℃培养24h后，观察结果，再按顺序滴加硝酸盐还原试剂，观察实验结果。

三、结果判定：

 接种以下质控菌株，36±1℃需氧培养24小时：

图1-1  动力-硝酸盐培养基微生物质控结果

备注：a：大肠埃希氏菌，b: 蜡样芽胞杆菌，c: 产气荚膜梭菌，d:单增李斯特氏菌，e：空白对照

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