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液体硫乙醇酸盐培养基原理和使用方法

张辉
录入时间:2019-3-13 10:41:21 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  液体硫乙醇酸盐培养基用于药品、生物制品的无菌检测,也可用于好氧菌和厌氧菌的检测。

  酪胨在培养基中作为基础营养物质;酵母粉提供B族维生素;L-胱氨酸和硫乙醇酸钠均能使体系处于低氧化还原电势,有利于消除菌体生长代谢过程中产生的对自身有害的过氧化物质,此外L-胱氨酸的巯基(-SH)可以中和重金属的毒性,因此可以用于带有重金属物质的无菌检验;氯化钠维持菌体细胞生长所需的渗透压;刃天青作为氧化还原指示剂,该指示剂氧化态为粉红色,还原态为无色;琼脂可阻止二氧化碳、氧气扩散进入,从而造成厌氧环境。

二、培养基配方(g/L):

  酪胨(胰酶水解)  15.0
  酵母浸出粉  5.0
  葡萄糖  5.0
  硫乙醇酸钠  0.5
  L-胱氨酸  0.5
  氯化钠  2.5
  刃天青  0.001
  琼脂  0.75
  pH值7.1±0.2(25℃)

三、试验方法:

  称取本品29.25g,加热搅拌溶解于1000mL纯化水中,分装适宜容器,其装量与容器高度的比例应符合,培养结束后培养基氧化层(粉红色)不超过培养基深度的1/2。121℃高压灭菌15分钟迅速冷却。在供试品接种前,培养基氧化层高度不得超过培养基深度的1/5。否则,须经100℃水浴加热至粉红色消失(不得超过20分钟),迅速冷却,只限加热一次,并应防止被污染。

四、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置30-35℃需氧培养24-72小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其他特征

金黄色葡萄球菌

CMCC(B) 26003

10-100

+++

在试管中呈颗粒生长

铜绿假单胞菌

CMCC(B) 10104

10-100

+++

在试管表层生长,浑浊

枯草芽孢杆菌

CMCC(B) 63501

10-100

+++

在试管表层生长,浑浊

生孢梭菌

CMCC(B) 64941

10-100

+++

浑浊

产气荚膜梭菌

ATCC 13124

10-100

+++

在试管氧化层以下呈条状生长

 

 

 

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