一、用途:
用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定(GB/T 8538-2008,GB/T 4789.28-2003,GB15979-2002,中华人民共和国药典2010年版)。
二、实验原理:
蛋白胨提供碳源和氮源;牛胆盐可抑制革兰氏阳性细菌的生长;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫是pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色。
三、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
20.0 |
牛胆盐 |
5.0 |
乳糖 |
10.0 |
溴甲酚紫 |
0.01 |
pH 7.4±0.1 25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
四、试验方法:
1、称取本品3.5g,加热溶解于100ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的20mm×150mm试管中, 每管10ml,115℃高压灭菌15分钟,备用。
2、制备质控菌液。
3、把质控菌液加入试管中。
4、在36±1℃培养24±2小时,记录实验结果。
五、结果观察与解释
接种以下质控菌株,在36±1℃培养24±2小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
良好 |
浑浊度2,且气体充满管内1/3 |
粪肠球菌 |
ATCC29212 |
1000-5000 |
抑制 |
浑浊度0(不生长)或浑浊度1(微弱生长),不产气 |
伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
良好 |
浑浊度2,不产气 |
弗氏柠檬酸盐杆菌 |
ATCC43864 |
10-100 |
良好 |
浑浊度2,且气体充满管内1/3 |
图1-2 乳糖胆盐发酵培养基微生物质控结果
备注:a:大肠埃希氏菌,b:弗氏柠檬酸盐杆菌,c:鼠伤寒沙门氏菌,d: 金黄色葡萄球菌,e:空白对照
六、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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