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乳糖胆盐发酵培养基的原理及实验现象

王娟
录入时间:2019-3-18 15:37:52 来源:青岛海博生物

一、用途:

  用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定(GB/T 8538-2008,GB/T 4789.28-2003,GB15979-2002,中华人民共和国药典2010年版)。

二、实验原理:

  蛋白胨提供碳源和氮源;牛胆盐可抑制革兰氏阳性细菌的生长;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫是pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色。

三、培养基配方(g/L):

  蛋白胨

20.0

  牛胆盐

5.0

  乳糖

10.0

  溴甲酚紫

0.01

  pH 7.4±0.1   25℃

  此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果

四、试验方法:

  1、称取本品3.5g,加热溶解于100ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的20mm×150mm试管中, 每管10ml,115℃高压灭菌15分钟,备用。

  2、制备质控菌液。

  3、把质控菌液加入试管中。

  4、在36±1℃培养24±2小时,记录实验结果。

五、结果观察与解释 

  接种以下质控菌株,在36±1℃培养24±2小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC25922

10-100

良好

浑浊度2,且气体充满管内1/3

粪肠球菌

ATCC29212

1000-5000

抑制

浑浊度0(不生长)或浑浊度1(微弱生长),不产气

伤寒沙门氏菌

ATCC14028

10-100

良好

浑浊度2,不产气

弗氏柠檬酸盐杆菌

ATCC43864

10-100

良好

浑浊度2,且气体充满管内1/3

 

图1-2  乳糖胆盐发酵培养基微生物质控结果

备注:a:大肠埃希氏菌,b:弗氏柠檬酸盐杆菌,c:鼠伤寒沙门氏菌,d: 金黄色葡萄球菌,e:空白对照

六、注意事项

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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