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平板计数琼脂原理和使用方法

张辉
录入时间:2019-4-26 14:04:44 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

  平板计数琼脂培养基用于菌落总数的测定。

  胰蛋白胨提供碳源和氮源;酵母膏粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂。

二、培养基配方(g/L):

  胰蛋白胨

  酵母浸粉

  葡萄糖

  琼脂

  pH值7.0±0.2(25℃)

5.0

2.5

1.0

15.0


三、试验方法:

  称取本品23.5g,加热搅拌溶解于1000mL纯化水中,分装试管或锥形瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。此培养基呈淡黄色,清晰无沉淀。

四、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养48±2小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控结果

其他特征

铜绿假单胞菌

ATCC 9027

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

无色透明菌落

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

无色透明大菌落

枯草芽孢杆菌

ATCC 6633

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

白色不规则菌落

蜡样芽孢杆菌

ATCC 11776

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

白色不规则菌落

金黄色葡萄球菌

ATCC 6538

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

淡黄色菌落菌落

  

a:大肠埃希氏菌  b:枯草芽孢杆菌  c:金黄色葡萄球菌  d:铜绿假单胞菌  e:蜡样芽孢杆菌

五、注意事项

  用于倾注计数时,倾注培养基的温度过高会损伤或烫死样品中的微生物而影响计数结果,一般倾注温度要求45℃左右为宜,因此,该培养基的制备应选用低凝固点琼脂以满足检测要求。

 

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