一、用途:
用于志贺氏菌的葡萄糖铵试验。
二、实验原理:
氯化钠维持均衡的渗透压;硫酸镁提供生长必须的微量元素;磷酸氢二钾是缓冲剂;能利用磷酸二氢铵作为唯一氮源且不需要尼克酸和氨基酸作为生长因子的微生物分解葡萄糖使培养基变酸性;溴麝香草酚兰是指示剂,产酸时培养基由绿色变为黄色;琼脂是培养基的凝固剂。有些细菌可利用铵盐作为唯一氮源,可在本培养基上生长良好,并分解葡萄糖产酸,是培养基变黄。
三、培养基配方(g/L):
氯化钠 |
5.0 |
硫酸镁 |
0.2 |
磷酸二氢铵 |
1.0 |
磷酸氢二钾 |
1.0 |
葡萄糖 |
2.0 |
琼脂 |
12.0 |
溴麝香草酚兰 |
0.08 |
pH 6.8±0.1 25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
四、试验方法:
1称取本品21.28g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,121℃高压灭菌15分钟,放成斜面,备用。
2、制备质控菌株斜面。
3、取新鲜质控菌株斜面,用接种针挑取菌苔在斜面上划“之”字形接种,将质控菌液划线于平板上。
4、36±1℃培养20-24h后,观察结果。
五、结果观察与解释:
接种以下质控菌株,在25±1℃培养48-168小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
质控评定标准 |
伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
生长良好,培养基变黄 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
CMCC(B)50115 |
生长良好,培养基变黄 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
生长良好,培养基变黄 |
福氏志贺氏菌 |
CMCC(B)51572 |
不生长,培养基不变色 |
宋内志贺氏菌 |
CMCC51592 |
不生长,培养基不变色 |
痢疾志贺氏菌 |
CMCC51252 |
不生长,培养基不变色 |
图1-2 DG18琼脂微生物质控结果
备注:a:大肠埃希氏菌,b:伤寒沙门氏菌,c:普鼠伤寒沙门氏菌,d:福氏志贺氏菌,e:宋内志贺氏菌,f:痢疾志贺氏菌,g:空白对照
六、注意事项:
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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