一、试验原理
酵母浸粉、蛋白胨和酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;溴甲酚紫为酸碱指示剂;琼脂为培养基凝固剂;含有色氨酸酶的细菌,能分解蛋白胨中的色氨酸,形成靛基质(吲哚)。靛基质无色,当加入对氨基苯甲酸试剂后,形成可见的红紫色醌式化合物;某些细菌可使鸟氨酸脱羧产碱,使底层呈紫色。不能产生鸟氨酸脱羧酶的细菌因发酵葡萄糖产酸,底层呈黄色。有动力的细菌在培养基中扩散生长,无动力的细菌沿穿刺线生长。
二、培养基配方
酵母浸粉 |
3.0 |
蛋白胨 |
10.0 |
酪蛋白胨 |
10.0 |
L-鸟氨酸盐酸盐 |
5.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
溴甲酚紫 |
0.02 |
琼脂 |
2.0 |
pH 6.5±0.2 25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
三、试验方法
1.称取本品31.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,每管约5ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。
2.取新鲜质控菌株斜面,用接种针挑取菌苔穿刺接种于试管中,并滴加石蜡覆盖,36±1℃培养24-48h后,滴加试剂,观察结果。
四、结果观察
接种以下质控菌株,36±1℃培养24-48h后:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
+++ |
动力+、吲哚-、鸟氨酸+ |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
动力+、吲哚+、鸟氨酸+ |
肺炎克雷伯氏菌 |
ATCC13883 |
+++ |
动力-、吲哚-、鸟氨酸- |
奇异变形杆菌 |
ATCC12453 |
+++ |
动力+、吲哚-、鸟氨酸+ |
产气肠杆菌 |
ATCC13048 |
+++ |
动力+、吲哚-、鸟氨酸+ |
a:产气肠杆菌;b:大肠埃希氏菌;c:肺炎克雷伯氏菌;d:奇异变形杆菌;e:鼠伤寒沙门氏菌
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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