一、试验原理:
胰蛋白胨提供微生物生长所需的营养,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为缓冲剂,维持PH值得稳定,牛胆盐和煌绿抑制革兰氏阳性菌和非肠道菌群的生长,D-甘露醇提供碳源。
二、培养基配方:
胰蛋白胨 |
10.0 |
D-甘露醇 牛胆盐 磷酸氢二钠 磷酸二氢钾 |
5.0 20.0 6.5 2.0 |
煌绿 |
0.0135 |
pH7.2±0.2 25℃ |
三、试验方法:
1、称取本品45g,加热溶解于1000ml纯化水中,分装于三角锥形瓶或试管中,100℃水浴灭菌30min,迅速在流动的冷水中冷却,无需高压灭菌。
2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜或采用其他制备方法,制备成含菌量10-100CFU/mL的菌悬液。
3、在装有待测培养基的试管中接种1 mL目标菌,非目标菌接种100-1000CFU,同时接种两个平行管,置于36℃培养18-24h。
四、试验结果:
接种以下质控菌株,在36±1℃培养18-24小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量/CFU |
试验结果 |
产气肠杆菌 |
ATCC13048 |
10-100 |
浑浊变黄 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
浑浊变黄 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
浑浊变黄 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
100-1000 |
抑制 |
图1 EEM培养基试验结果
a:大肠埃希氏菌;b:鼠伤寒沙门氏菌;c:产气肠杆菌;d:金黄色葡萄球菌;e:空白对照
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