常见问题解答

湿热灭菌后的培养基，需要确认什么项目？另外TSB采用湿热灭菌，对于配制的浓度是否有要求？

                         
首先，需要确认配置培养基的灭菌锅是否做过验证；其次，湿热灭菌配置的培养基是否做过促生长实验，也就是说，该灭菌程序是否通过如满载、空载、1/2、3/4的验证。以上两个步骤也仅仅只是保证配置完成的培养基是无菌的。同时，也需要保证整个模拟灌装流程也是无菌的，尤其是如何转移、传递到洁净区的问题，这也正是无菌工艺的难点所在（可参考欧盟附录）。

其中配置的培养基经过灭菌、装载等验证也面临同样的问题，如何转移使用、如何对接，始终困扰客户。为了解决用户对于自配培养基的配置、转移等步骤的无菌性要求，即用型培养基是比较好的解决方法，最大程度避免了各个环节的污染风险。

对于TSB的配置浓度法规规定标准浓度为30克TSB干粉加一升水，需要严格按照法规来执行。

其它问题

模拟灌装时限是否需要和工艺验证的灌装时限一致？比如工艺规程描述灌装的药液过滤后存放时限是16小时，模拟灌装也需要做到16小时吗？

无菌工艺模拟时，原液阶段的模拟收集所有培养基都需要培养后检测是否污染，透明容器（如玻璃瓶）收集的培养基是否是培养后直接观察，如果是不透明的PP桶，是否只需要培养后取样进行无菌检查确认？

培养基配置有哪些注意事项？

防止蔓延的方法有哪些？

异常现象平板如何进行菌落计数？