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常见问题解答

平板在培养箱中培养后,有的平板干裂严重,有的平板出水严重,是什么原因?如何解决?


  主要与琼脂的保水性和弹性、平板厚度、平皿的透气性、培养箱条件有关。

  琼脂:不同的琼脂在保水性方面略有差异,而琼脂的弹性会影响是否开裂。弹性差的琼脂在大量失水后,易出现开裂;而弹性好的琼脂在大量失水后,易出现变薄或缩小现象。

  平板厚度:平板越薄越容易干裂。通常使用的平板培养基厚度为2-3mm,若培养时间较长或干裂问题较严重,可适当增加培养基厚度。

  平皿的透气性:新制备的平板一般不容易出现干裂问题,而长时间保存的平板更容易出现干裂现象,这主要与平板的透气性有关。平板的密封性越好,保存和培养过程中培养基失水越少。虽然增加平板的密封性可以减少水份流失,但并非密封性越高越好。一些需氧型微生物(如铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌),在密闭环境中生长较差,需要良好的透气性才能较好的生长。而对于一些生化鉴定类培养基平板(如XLD平板),细菌的生长和生化反应的发生需要有氧气参与,密闭的平皿反而会得到较差的实验结果。因此在选用平皿时,需结合实际情况选择合适透气性的平皿。

  培养条件:培养箱是影响平皿干裂问题的关键因素之一。大型的培养箱为了保证内部温度均一,通常带有较强的鼓风系统,内部有较强的空气流动。而气流越强,则越容易导致平皿失水。而对于一些没有鼓风系统的小型培养箱,则很少会出现平皿干裂现象。在培养箱内摆放平皿时,应尽量避开风口气流大的位置,同时远离培养箱内部发热板。

  因此,在遇到平板干裂问题时,可通过增加平板培养基厚度、培养箱内增加挡板降低气流或避开风口、选择合适透气性的平皿、减少使用长期存放的平板等方面进行解决。

其它问题
  • 平板进行涂布接种或划线接种时,经常出现菌落片状生长或蔓延,是什么原因?
  • 按照标准进行培养基配制时,有时候制成的平板凝胶强度较低,可否增加琼脂含量来提高平板的凝胶强度?是否会对微生物的生长造成不良影响?
  • 灭菌后的培养基,在47-50℃呈液态状可以保存多久?是否可以过夜或更长时间保存?对培养基性能会有影响吗?
  • 已经制备好的固体培养基平板,可以保存多久使用?应如何保存?
  • 灭菌后的琼脂培养基若未用完,可以下次再重新溶化继续使用吗?
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