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博检革兰氏阴性细菌鉴定系统

博检革兰氏阴性细菌鉴定系统

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  • 商品货号:H8679
  • 商品品牌:青岛海博
    商品规格:5
  • 上架时间:2012-07-25
    商品点击数:5287
  • 本店售价:¥300元
    用户评价: comment rank 5
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商品描述:

商品属性

  博检革兰氏阴性细菌鉴定系统使用说明 青岛海博生物技术有限公司
www.hopebiol.com

   本系统由青岛高科园海博生物技术有限公司联合山东省出入境检验检疫局共同研发设计,经相关部门验证完全符合GB/T 4789.4、GB/T 4789.5、GB/T 4789.6、GB/T 4789.7、GB/T4789.8、GB/T 4789.36、GB/T 4789.40,具有与API20E和VITEK GNI+相同的鉴定效果,可广泛用于革兰氏阴性细菌的鉴定。

原理
   不同种属的细菌具有不完全相同的生化特征。本系统选取21种典型生化试验,并把生化反应的结果转换为一个8进制数,通过提供的标准数据库查询系统可得到实验菌株归属的相对概率、T值和R值,对菌株的归属进行一定程度的鉴定。

生化鉴定系统组成
   本系统含20孔生化鉴定条及一个氧化酶试纸条,分别为ONPG、精氨酸(ADH)、赖氨酸(LDH)、鸟氨酸(ODC)、柠檬酸(CIT)、硫化氢(H2S)、脲酶(URE)、乳糖(LAC)、吲哚(IND)、VP、明胶(GEL)、葡萄糖(GLU)、甘露醇(MAN)、肌醇(INO)、山梨醇(SOR)、鼠李糖 (RHA)、蔗糖(SAC)、蜜二糖(MEL)、苦杏仁甙(AMY)、阿拉伯糖(ARA)、氧化酶(OX)。

附品
   2个打孔器、5张记录卡、1份使用说明书。

所需试剂及仪器
  仪器:1根接种环、2个100ul无菌枪头、1支100ul移液器、混匀器、酒精灯、冰箱、培养箱、记号笔。
  试剂:无菌液体石蜡、0.85%NaCl生理盐水、1套VP试剂、1支Kovacs氏靛基质试剂。建议使用海博公司产品。
  其它:1个营养琼脂或胰蛋白胨大豆琼脂平板

存储
  2~8℃,避光保存,并在有效期内使用。
  为保证实验的有效性,实验应在无菌环境下进行

1.准备

  1.1 从包装盒中取出一条生化鉴定条,打开盖子,用打孔器开孔。如果染菌或变色,则不能使用,重新拿一条。
  1.2 使用接种环从预先准备好的营养琼脂或胰蛋白胨大豆琼脂平板上挑取单个菌落至2ml无菌生理盐水中,仔细研磨后,在混匀器上混匀,制备菌悬液。

2.接种
    2.1 取出在避光纸保藏中的氧化酶试纸条,使用移液器滴加100μl 0.85%NaCl溶液于纸条一端,挑取待测菌单菌涂抹落于浸湿的纸条上,60s内观察并记录结果。
    2.2 用移液器向生化鉴定条每孔中加入100μl制备好的菌悬液。
    2.3 吸取200-300μl无菌液体石蜡覆盖ADH、LDH和ODC孔。
    2.4 盖上生化鉴定条盖子,放入塑料底托中。
    2.5 35-37℃恒温培养18-24小时;明胶生化反应若在18-24小时为阴性,可继续再培养18-24小时,转冰箱2-8℃ 30mins。

3.结果判读
    3.1 VP试验:取出试剂盒,向VP孔内滴加6滴VP A液和2滴VP B液后,摇动,置于35-37℃恒温培养箱继续培养30分钟后取出,培养基变为红色表明为阳性反应。
    3.2 IND试验:滴加1-2滴Kovacs氏靛基质试剂,摇动,两分钟内出现粉红色环表明为阳性反应。
    3.3 明胶:呈液态为阳性,固态为阴性。
    3.4 其它生化反应按照表1进行判断。

 

4.编码
  4.1 以表2为例,将细菌各项生化反应结果填入附赠的记录卡中,依次每三项为一组,若这三项反应均为阳性,则分别记为1、2、4,若为阴性,则相应项记为0。将每组三项的数值相加,共七组,组成一个七位数。
  4.2 将所得七位数输入数据库系统中即可进行查询。
  4.3 若某项生化反应结果较难判断,则按照阴性进行记录,但查询时,应在不定的生化反应前打钩。
  4.4 若有必要,可根据系统给出的信息进行补充试验。

5.注意事项
  5.1 鉴定系统采用一次性材料生产而成,使用后请高压灭菌。
  5.2 本系统目前仅用于革兰氏阴性细菌。
  5.3 系统数据库将随时更新,不断扩大鉴定范围。

表2:博检革兰氏阴性细菌鉴定系统记录卡使用示例

样品来源(菌种编号):大肠埃希氏菌ATCC25922   时间:09.02.09   实验人:青岛海博生物

第一组

第二组

第三组

第四组

第五组

第六组

第七组

ONPG

ADH

LDH

ODC

CIT

H2S

URE

LAC

IND

VP

GEL

GLU

MAN

INO

SOR

RHA

SAC

MEL

AMY

ARA

OX

1

2

4

1

2

4

1

2

4

1

2

4

1

2

4

1

2

4

1

2

4

+

-

+

+

-

-

-

+

+

-

-

+

+

-

+

+

-

+

-

+

-

1

0

4

1

0

0

0

2

4

0

0

4

1

0

4

1

0

4

0

2

0

5

1

6

4

5

5

2

检索结果:大肠埃希氏菌   id%=98.93%   T=0.99   R=191.72 很好的鉴定结果

6.质量控制

ONPG ADH LDH ODC CIT H2S URE LAC IND VP GEL GLU MAN INO SOR RHA SAC MEL AMY ARA OX
大肠埃希氏菌 ATCC25922   5164552
+ - + + - - - + + - - + + - + + - + - + -
霍乱弧菌 非O1群
+ - + + + - - - + + + + + - - - + - + - +
奇异变形杆菌 ATCC12453   05(7)14(6)00(2)0
- - - + V + + - - - V + - - - - V - - - -
肺炎克雷伯氏菌 ATCC35657   522(3)4(5)773
+ - + - + - V + - V - + + + + + + + + + -
粘质沙雷氏菌 ATCC14041   5307721
+ - + + + - - - - + + + + + + - + - + - -

 

 

 

 

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