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大肠杆菌显色培养基
E. coli Chromogenic Medium


用途:用于快速、准确检测大肠杆菌,培养24小时,显蓝绿色

应用范围:大肠杆菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌的快速检测。大肠杆菌显蓝绿色,大肠菌群显无色,其它菌显黄色或无色,革兰氏阳性菌被抑制。

成份 (g/L):

  特殊营养物质

37.9  

  显色剂

0.2  

  琼脂

12.0  

pH 6.8 ± 0.2 25 ℃

此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。

注意:
  此培养基仅供实验室使用。
用法:
   称取本品 50.1g 加入 1000ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。分装三角瓶, 121 ℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心,倾入冷却至 45 -50 ℃ 培养基约15ml ,混匀,凝固后, 36 ± 1 ℃ 倒置培养 18 ~ 24h 。或冷却至 45-50 ℃时,倾入无菌平皿,琼脂完全凝固后,在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml ,涂布于培养基上, 36 ± 1 ℃培养 18 ~ 24h 。
贮存:
  制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效: 
  干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤: 
1 、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液
2 、取样品液 1ml 加入 冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或 涂布于平板上
3 、 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h ,选用有 30 ~ 200 个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。
总大肠杆菌 = 蓝绿色菌落
4 、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36 ± 1 ℃培养 12-16 小时,挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验 ( 本公司有生化鉴定管套装 20 支 x3 种 )
质量控制:
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h 小时:

质控菌株

ATCC

生长情况

菌落颜色

  单增李氏菌

27853

-/+

无色

金黄色葡萄球菌

25923

-/+

无色

大肠杆菌

25922

+++

蓝色

沙门氏菌

+++

无色

大肠菌群

+++

无色

方法的局限性: 
  该显色培养基鉴定大肠杆菌 ,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。

典型特征: 
  大肠杆菌典型菌落为蓝绿色,大肠菌群为无色菌落,其它细菌为无色或黄色菌落。

参考文献: 
  FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of ?-glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. – J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
  KILIAN, M. a. BüLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. – Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
  LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la ?–galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bactériologique, en particulier des Enterobacteriaceae. – Ann. Inst. Pasteur ( Paris ), 102; 267-277 (1962).

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