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弧菌显色培养基(第二代)
Vibrio Chromogenic Medium


用途:用于弧菌的显色培养,副溶血性弧菌显蓝色,霍乱弧菌显红色,其它弧菌显红色或无色。

应用范围:弧菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、海产品、病人粪便样品和水产品中副溶血性弧菌的快速检测。副溶血性弧菌显蓝绿色且菌落比较大,霍乱弧菌和创伤弧菌显紫红色,溶藻弧菌显淡黄色或米黄色;其它细菌绝大部分被抑制。本培养基的特异性高,可以克服TCBS培养基引起的假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。 

配方(g/L):
 

 特殊营养物质

  75.0 

 混合显色剂

  4.45 

 琼脂 

 15.0 

 pH 8.6±0.1  25℃

此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。 

用法:

  称取本品 18.9g 加入 200ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸3-5次。冷却至 45-50℃ 时,倾入无菌平皿。
  注意:制备好的培养基表面不能太干燥。

操作步骤:
  1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液; 
  2、取 1ml 样品液加入 9ml SCPB肉汤或碱性蛋白胨水中,36±1℃ 增菌培养 18-24 小时;
  3、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到弧菌显色培养基上,做 2 个平板;
  4、36±1℃培养 18-24h,副溶血性弧菌显蓝绿色,菌落比较大;霍乱弧菌和创伤弧菌显紫红色,溶藻弧菌显淡黄色或米黄色,其它细菌绝大部被抑制
  5、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上36±1  12-16 小时,挑取单菌落做副溶血性弧菌全套生化试验

质量控制:
  1、外观

      此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈淡粉色至黄色固体。
  2、微生物试验
      在36±1℃培养18-24h小时

质控菌株

 菌株编号

 生长情况

 菌落颜色

副溶血性弧菌

ATCC 17802

+++

蓝绿色,菌落比较大

 金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

-

 -

大肠杆菌

ATCC 25922

-

 -

溶藻弧菌

ATCC 17749

+++

淡黄色或米黄色

非01群霍乱弧菌

 

 +++

 紫红色

创伤弧菌

ATCC 27562

+++

紫红色


方法的局限性:
  本培养基不能直接鉴定霍乱弧菌,副溶血性弧菌的特异性可达 95%,准确性非常高,有时可能需做其它补充试验。
典型特征:
  典型副溶血性弧菌显蓝绿色且菌落比较大,霍乱弧菌和创伤弧菌显紫红色,溶藻弧菌显淡黄色或米黄色 

贮存:
  制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效:
  干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意:
  此培养基仅供实验室使用。
参考文献:
  1、Kobayashi, T., S. Enomoto, R. Sakazaki, and S. Kuwahara. 1963. A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS(modified Nakanishi's agar). Jpn, J. Bacteriol. 18:387.
  2、Nakanishi, Y. 1963. An isolation agar medium for cholerae and enteropathogenic halophilic vibrios. Modern Media. 9:246.
  3、Baron, E. J., L. R. Peterson, and S. M. Finegold. 1994. Vibrio and related species, Aeromonas, Plesiomonas, Campylobacter,Helicobacter, and others, p. 429-444. Bailey & Scott's diagnostic microbiology, 9 th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis, MO.

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