7.5%氯化钠肉汤原理及使用方法

一、试验原理：

  用于金黄色葡萄球菌的选择性增菌培养。

  蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质；较高浓度的氯化钠提供较高的渗透压，抑制大多数非葡萄球菌的微生物。

二、培养基配方（g/L）：

三、试验方法：

 1、培养基制备：称取本品90.0g， 加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶或试管，121℃高压灭菌15分钟，备用。制备好的液态培养基保存于2-8℃，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处，室温保存。

 2、制备质控菌液。

 3、接种

  3.1混合菌的接种

  在装有待测培养基的试管中接种10-100CFU的目标菌，并接种1000-5000CFU的非目标菌，接种总量1ml，同时接种两个平行管，混匀。同时分别将目标菌菌悬液（与试管接种同一稀释度）和非目标菌菌悬液（比试管接种小10-100倍稀释度）1ml倾注平板，接种两个平板，作接种量计数用，36±1℃培养18-24小时。

  3.2非目标菌接种

  在装有待测培养基的试管中接种1000-5000CFU的非目标菌，接种量1ml，同时接种两个平行管，混匀，36±1℃培养18-24小时。

 4、培养液的接种

  4.1混合菌培养液的接种

  用10μL接种环取1环经培养后的混合菌培养液，换线接种到Barid-Parker上，每管接种一个平板，36±1℃培养45-48小时。

  4.2非目标菌培养液的接种

吸取10μL经培养后的非目标菌培养液，均匀涂布接种到TSA上，每管接种一个平板。也可使用倾注法进行接种，36±1℃培养18-24小时。

 5、记录实验结果

  目标菌在选择性平板上的菌落应>10CFU，则表示待测液提培养基的生长率良好；非目标菌在非选择性平板上的菌落<100CFU，则表示待测液体培养基的选择性为良好。

四、结果观察与解释

  接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时：

图1 7.5%氯化钠肉汤微生物质控结果

备注：a：金黄色葡萄球菌(ATCC25923)，b：金黄色葡萄球菌(ATCC6538)，c：大肠埃希氏菌，d：空白

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