革兰(Gram)氏染色液

【原理】

  革兰氏染色法的原理尚未完全弄清楚，主要有下列3种学说。

  1.等电点学说:革兰氏阳性细菌的等电点(pH2~3)比阴性细菌(pH4~5)为低,一般染色时溶液的pH约在7附近所以阳性菌所带的阴电荷比阴性菌多,摄取碱性染料则较多，结合力强，故不易脱色。

  2.化学学说:革兰氏阳性菌细胞内含有某些特殊化学成分,认为主要是核糖核酸镁盐与多糖的复合物,它能与染料及碘结合成复合物,故不易被酒精溶解脱色。阴性细菌因无此种成分,故易被酒精脱色。

  3.通透性学说:革兰氏阳性菌细胞膜的通透性比阴性菌小,进入阳性菌细胞内的染料及碘液与菌体内成分结合生成沉淀,因胞膜通透性小,不易被脱色,故不再被复染。革兰氏阴性菌胞膜通透性大,对染料及碘与菌体内成分结合生成的沉淀,易被酒精溶解脱出,故可被复染。

【成分】

【制法】

  (1)将结晶紫溶于乙醇中制成饱和液,再取此饱和液20ml与草酸铵溶液混合即成;

  (2)先将化钾溶于10ml蒸馏水中,再加碘至全部溶解后,加蒸馏水至200ml即成;

  (3)将丙酮加于乙醇中即成丙酮乙醇溶液;

  (4)稀释石炭酸复红液。

【用途】

  用于细菌的鉴别染色,由此可将细菌分为革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌两大类

【注意事项】

  1.新配制的染液应先用已知的革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌)和阴性菌(如大肠杆菌)作对照试验,以确定所配染色液的质量。

  2.结晶紫与草酸铵混合液,不易保存,如有沉淀出现,应重新配制。

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