半固体培养基

【成分】

【制法】

  将琼脂于液体培养基中煮溶后,调整至pH7.4,分装于试管或小烧瓶中,121℃灭菌15分钟后,备用。

【用途】

  固体琼脂平板多用于点滴定量或不必精确定量适当稀释的噬菌体裂解试验,如检查噬菌体的有无或初步略知其数量等,或用于噬菌体RTD(细菌的噬菌体分型时“常规试验稀释度”)的测定,噬菌体分型试验及噬菌体的其它很多试验也用此琼脂平皿;也可用作双层琼脂平皿的底层，以提供试验层的营养。

  半固体琼脂主要用于双层琼脂平皿的上层,多用于观察噬斑,于上层加入一定体积,经不同稀释的噬菌体及宿主菌培养物,能方便和较准确的测定噬菌体的数目(每毫升所含噬斑形成单位的数量Pfu/ml),有些菌容易在固体琼脂平皿表面形成融汇的菌苔,也可将菌培养物加入到半固体琼脂中制成上层代替固体平皿,可形成适合于点滴噬菌体的试验,观察在菌苔上裂解结果。以上两种培养基制成琼脂平皿也可用于高效价噬菌体的制备,即用少量液体培养基收集固体琼脂平皿表面或双层琼脂平皿上层的培养物或几乎融汇的裂解物，经离心去除其残余,再除菌滤过即可得到。

【注意事项】

  如需加入氯化钙,为避免加入后高压灭菌发生混浊,氯化钙溶液应单独灭菌,在使用前加入，使浓度为400μg/ml即可。

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