温度是培养基保存环境重要的监测指标之一,有些培养基可室温保存,有些则需要冷藏或者冷冻保存,这是由培养基不同组分的稳定性决定的。
1.琼脂:在干粉状态下,琼脂受温度影响不大室温或者冷藏甚至是冷冻,对干粉的琼脂稳定性无明显的不利影响。但琼脂一旦加水制成培养基,则保存温度不能低于零度,因为水在零度以下会结冰形成微小冰晶,破坏琼脂的原有结构,失去原有的性质且不能完全恢复。室温或更高温度保存下虽然对琼脂无明显不利影响,但考虑到保水和其他组分的稳定性,因此制备好的琼脂培养基一般保存温度不宜过高,建议不超过30℃,需要长期保存的可以选择密封冷藏保存。
2.蛋白胨/酵母浸粉/牛肉浸粉/维生素等成分:通常本身可以经过121℃短时间灭菌,对温度没有那么敏感,室温以下保存一般可以保证较长时间的稳定性,冷藏或冷冻也无不利影响。但需注意,配制好的溶液若经过冷冻保存,可能会出现析出现象,这个现象是可逆的,解冻后摇匀使用,不影响效果。
3.无机盐/小分子有机盐类:多数无机盐(像氯化钠、磷酸盐等)或有机盐(醋酸钠、柠檬酸钠等)对温度并不敏感,室温、冷冻或冷藏保存对这些盐类无不利影响,但需注意,温度降低会导致许多盐类的溶解度下降,出现结晶析出,因此特别是含有较多盐的培养基在低温保存时,需要考虑结晶析出和溶液均一性的问题。
4.抗生素类:许多抗生素都是不耐热的,需要冷藏或冷冻保存。即使是一些相对稳定的抗生素,在室温保存时也会大大缩短效期,抑菌效果逐渐下降,因此含有抗生素的培养基在进行长期保存时,通常需要冷藏或冷冻保存。
5.不稳定的盐类或糖类/显色剂等:如亚硫酸钠,木糖等物质,温度较高时会缓慢分解,冷藏保存则会明显延长保存的效期,因此对于含有不稳定成分的培养基,要么是需要现配现用,要么需要冷藏保存短时间内使用。
6.胆盐、染料物质:相对稳定,低温或高温对这些物质无明显的不利影响,可以在室温长期储存,但需要注意,有些染料在同时有光照和高温的情况下会发生颜色改变或褪色,因此对于有颜色的培养基,还是建议冷藏保存。
7.血液:含有新鲜血液的培养基(如血平板)需要冷藏保存,血细胞比较娇贵,温度过高血细胞很容易破裂变黑,温度低于0度则会由于结冰导致血细胞出现破裂,因此只能冷藏保存。而一些含裂解血或血清的培养基,则可以进行冷藏或冷冻保存。
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