TBX与VRBA-MUG培养基比较

  GB4789.38-2025《食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数》标准将在2025年9月16日正式实施。在大肠埃希氏菌平板计数法中，由原先的将冷却至45℃±0.5℃的结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）倾注于每个平皿中。小心旋转平皿，将培养基与样品匀液充分混匀。待琼脂凝固后，再加3mL-4ml VRBA-MUG覆盖平板表层。更改为尽快将冷却至48℃±2℃的TBX琼脂倾注与培养皿中，每皿15ml-20ml。小心旋转培养基，将培养基与接种的样品匀液充分混匀，水平静置待其凝固。

  现我们比较一下TBX与VRBA-MUG配方

  TBX配方

  VRBA-MUG配方

  两者都具有能和大肠埃希氏菌具有的β-葡萄糖醛酸苷酶进行反应成分。

  在TBX培养基中，大肠埃希氏菌具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性，能分解5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸苷，在TBX琼脂上形成蓝绿色菌落，对其进行平板计数和鉴定。在VRBA-MUG培养基中，大肠埃希氏杆菌含有的β-葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷（4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG）的β糖醛酸苷键，使其水解，释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光，然后进行平板计数。

  VRBA-MUG培养基观察荧光计数的方法存在一定的局限性，需要用到紫外灯观察，在菌落密集的地方，是一片荧光，不能明显的分辨哪个菌落产生荧光，哪个菌落不产生荧光,故在最后计数时，会产生误差。TBX就很好的解决了这一点，不需要借助紫外灯，即使在菌落密集的地方也能分辨出每个菌落的颜色，使最后计数的结果更加清晰直观。

  还有一点是绝大多数大肠埃希氏菌具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性，但大肠埃希氏菌O157等菌株没有β-葡萄糖醛酸苷酶活性；另外肠杆菌科内一些志贺氏菌，沙门氏菌等菌株也具有β-葡萄糖醛酸苷酶活性，使我们检验中使用这两种培养基可能存在假阳性和假阴性的风险。

  总的来说新标准培养基的更换还是使我们的检验更加简便，从原来的准备两种培养基倾注，变成一种培养基倾注，计数过程也更加轻便，不用使用366nm的紫外灯照射。

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