2025版GB4789.30单增李斯特氏菌检验标准主要变化解读

1.使用Fraser培养基代替李氏增菌肉汤

  新版标准使用的Fraser肉汤是参考了ISO 11290标准的检验方法，相比较与上一版本的李氏增菌肉汤，Fraser肉汤中吖啶黄素的浓度稍低一点，李斯特氏菌生长速度会更快一些，提高了检出限，Fraser肉汤中同时含有七叶苷和柠檬酸铁铵具有指示能力，李斯特氏菌大量繁殖时可以观察到培养基变黑的反应，而李氏增菌肉汤中不含铁盐，外观上无明显特征。

2.李斯特氏菌显色培养基配方的加入

  之前版本的标准中虽然在检验过程中需要用到李斯特氏菌显色培养基，但并未写配方，使用者通常只能选择购买商品化的培养基。此次更新加入的李斯特氏菌显色培养基配方也是参考了ISO 11290标准中的配方做了公开，使用者也可选择自行购买原材料配制培养基。同时还详细写出了李斯特氏菌在显色培养基上的特征表现，供检验者做为参考使用。

3.分离鉴定

  上一版标准在初筛一步是从选择性平板上挑取菌落直接鉴定，这个操作有一定风险，一方面是因为选择性培养基上的成分有可能对生化鉴定结果产生影响，一方面是有可能挑取到的菌落不纯，得到错误的鉴定结果。而新标准中则是先要求挑取典型或可疑菌落接种至TSA-YE平板或羊血平板进行纯化，再挑取非选择性平板上的菌落进行鉴定，相对更为合理。而生化反应的项目跟之前没有变化（检验流程图中的氧化酶实验是刊误，应为过氧化氢酶试验），动力试验的描述则更为详细了。

  注：新标准在生化鉴定表1下方增加了两条细节描述，第一条描述为“部分单核细胞增生李斯特氏菌不溶血，个别单核细胞增生李斯特氏菌血清型不能发酵鼠李糖”，第二条备注为“-代表90%-100%的菌株阴性，+代表90%-100%的菌株阳性”，这意味着实际检验中有几率碰见生化异常的单增李斯特氏菌，按照标准中规定的生化鉴定操作并不能完全相符。

4.平板计数法的更改

  使用磷酸盐缓冲液和无添加剂的Fraser肉汤代替了原来的缓冲蛋白胨水和李氏增菌肉汤，对检验结果无明显改变，但磷酸盐缓冲液相比较于缓冲蛋白胨水，成本更低一些。

  在接种方式上，李斯特氏菌含量高的样品使用0.1mL的稀释液直接涂平板，含量低的样品涂平板方式与之前标准相同，这样在某些情况下也是减少了李斯特氏菌显色平板的用量，节省了成本（显色培养基价格通常都是远高于一般的培养基。）

5.结果报告

  新标准中详细描述了对于检验结果报告的方式，增加了数值修约原则，更通俗易懂。

6.其他培养基的更改

  Palcam琼脂的添加剂配方上一版存在错误，新版本已进行了更正，其他有部分培养基的成分描述或pH稍有改变，不影响检验结果。

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