沙门氏菌的活化、保存和鉴定

一、沙门氏菌简介

  沙门氏菌（Salmonella）是一种常见的肠道致病菌，特别是受粪便污染的环境、水、肉制品和蛋制品等食品中易存在，革兰氏染色为阴性杆菌，兼性厌氧，存在多种生化群，大约2000个血清型，因此在进行鉴定时要比其他菌复杂一些，目前在GB4789.4-2024标准中列出了常见的7个生化型，I型和II是最常见的沙门氏菌生化群，绝大多数菌株可以产硫化氢，赖氨酸脱羧酶为阳性，有动力，不发酵乳糖。而III型亚利桑那亚种和双相亚利桑那亚种为乳糖迟缓发酵型（ONPG阳性，乳糖阴性）或乳糖发酵型（ONPG和乳糖反应均为阳性），与其他沙门明显不同，在三糖铁琼脂上表现为A/A，在XLD和HE琼脂上可形成与大肠菌群相似的黄色菌落，传统的培养基难以分离辨识。

二、沙门氏菌的培养

  沙门氏菌的生长特性与大肠菌群类似，营养要求低，易存活，常用的非选择培养基基本上都可以使用，如TSA/TSB、NB/NA、BHI、LB、PCA等，30-37℃培养18-24h即可快速培养成功，在平板上菌落通常为无色透明状或接近培养基本身的颜色。菌种活化不宜采用选择性培养基（如TTB、XLD、SC、RVS等）。

三、沙门氏菌的保存

  由于沙门氏菌易存活的特点，一般的菌种保存方法均可使用。短期保存可以使用斜面保存法或半固体保存法，在2-8℃可存活1-3个月甚至更久，使用瓷珠法、甘油法活脱脂牛奶进行冷冻保存，在-20℃可存活至少一年以上，在-70℃以下可存活数年甚至数十年以上，一般不容易死亡。称取本品46.2g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15min，备用。

四、菌种的生化鉴定

  由于沙门氏菌的生化群较多，生化反应并不完全一致，可参考GB4789.4标准或细菌鉴定手册进行判断，也可使用生化鉴定系统。

  GB4789.24标准生化判断图表：

  生化1：典型沙门氏菌反应，大多数沙门氏菌都是这个反应。

  生化2：可能为靛基质阳性变体的沙门氏菌，需结合血清学结果确认。

  生化3：尿素酶出现阳性大概率不会是沙门，但仍然要通过血清学试验进行确证。

  生化4：可能为甲型副伤寒沙门菌，必须同时做血清符合才能确认。

  生化5：可能为不产硫化氢的沙门氏菌，需要结合血清学结果确认。

  生化6：可能为KCN阳性的沙门氏菌生化群，需补做其他生化。（IV型的其他生化反应为卫矛醇-、ONPG-、丙二酸盐-、明胶液化+、山梨醇+、酒石酸盐-、半乳糖醛酸+、粘液酸-、γ-谷氨酰转肽酶+、β-葡糖醛酸酶-、水杨苷+、乳糖-、O1噬菌体裂解-；V型的其他生化反应为卫矛醇+、ONPG+、丙二酸盐-、明胶液化-、山梨醇+、酒石酸盐-、半乳糖醛酸+、γ-谷氨酰转肽酶+、β-葡糖醛酸苷酶-、粘液酸+、水杨苷-、乳糖-）

  若生化反应结果不在以上表格中，则为非沙门氏菌。

  也可使用博检革兰氏阴性菌鉴定系统 点击查看

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