一、试验原理:
用于测定磷细菌肥料中磷细菌分解无机磷的效能
无机磷细菌能分泌有机酸(如柠檬酸、葡萄糖酸)或酶,将难溶性磷酸盐(如Ca₃(PO₄)₂、FePO₄、AlPO₄)转化为可溶性磷酸盐,供植物吸收利用。
磷酸钙作为唯一磷源,仅能利用溶解性磷的微生物无法生长,而解磷菌通过溶解磷化合物形成透明圈(溶磷圈),葡萄糖为微生物生长提供碳源,硫酸铵为微生物生长提供氮源,其他无机盐(如Mg²⁺、K⁺)用于维持微生物代谢。
难溶性磷酸盐的添加使培养基呈浑浊状态,解磷菌生长后周围产生透明区域。
二、培养基配方(g/L):
葡萄糖 |
10.0 |
硫酸铵 |
0.5 |
氯化钠 |
0.3 |
硫酸镁 |
0.3 |
硫酸锰 |
0.03 |
硫酸钾 |
0.3 |
硫酸亚铁 |
0.03 |
磷酸钙 |
5.0 |
琼脂 |
15.0 |
pH7.0-7.5 25℃ |
三、试验方法:
称取本品17.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
绿针假单胞菌 |
CICC22693 |
/ |
+++ |
菌落周围有溶磷圈 |
五、注意事项
1、磷酸钙需充分悬浮,确保均匀分布。
2、可溶性磷源(如KH₂PO₄),无法筛选解磷菌。
3、溶磷圈可能需培养5天后明显显现,需耐心观察。
4、纯化菌种时需多次转接至新鲜培养基。
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