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含糖牛肉汤琼脂培养基检验原理和使用方法

张辉
录入时间:2025/5/26 11:02:07 来源:青岛海博生物

一、检验原理:

  该培养基用于粪肠球菌的分离培养。

  牛肉浸粉和蛋白胨提供微生物生长所需的碳源、氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖为可发酵的糖类;溴甲酚紫为pH指示剂,发酵乳糖产酸的细菌菌落为黄色;琼脂是培养基的凝固剂。


二、培养基配方(g/L):

牛肉浸粉

3.0

氯化钠

5.0

蛋白胨

10.0

乳糖

20.0

溴甲酚紫

0.06

琼脂

15.0

pH值7.0±0.1(25℃)


三、试验方法:

  1. 称取本品53.1 g,加热煮沸完全溶解于1000 mL蒸馏水中,分装,115℃高压灭菌20 min,倾入无菌平皿,备用。

  2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液,吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基和参比培养基(HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂(TSA))。

  3. 放置于恒温培养箱36℃需氧培养24 h-48 h,观察试验结果。


四、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置36℃需氧培养24 h-48 h,试验结果如图1所示。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

回收率

生长情况

其他特征

粪肠球菌

ATCC 29212

50-250

≥70%

+++

黄色菌落,菌落周围变黄

屎肠球菌

ATCC35667

50-250

≥70%

+++

黄色菌落,菌落周围变黄

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

50-250

≥70%

+++

黄色菌落,菌落周围变黄

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

50-250

≥70%

+++

黄色菌落,菌落周围变黄


图1 质控菌株在含糖牛肉汤琼脂培养基上的生长情况


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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