【原理】
布氏血琼脂含有丰富的营养成分,同上述胰蛋白胨大豆培养基一样,又加有血液。其中亚硫酸钠作为还原剂,可降低培养基中氧化还原电位,造成厌氧环境,故用于厌氧菌药敏试敏试验比较适宜。
【成分】
胰蛋白胨
15g
葡萄糖
1g
L半胱氨酸
1g
大豆蛋白(木瓜酶消化)
10g
酵母浸膏
2g
亚硫酸钠(NaHSO3)
0.1g
氯化钠
5g
琼脂
15g
维生素K1
10mg
1%氯化血红素
0.5ml
羊血或马血
50~100ml
蒸馏水
1000ml
【制法】
(1)用量简量取所需蒸馏水,倒入烧杯中;
(2)分别称取上述各固体成分,加入蒸馏水中,搅匀,煮沸溶解;
(3)配制1%氯化血红素:称取100mg氯化血红素,溶于1N氧化钠10ml溶液中,配成1%浓度;
(4)吸取1%氯化血红素0.5ml,加入上述培养基中,混匀;
(5)在室温下调整至PH7.4;
(6)分装后,121℃灭菌15分钟;
(7)待冷至50℃时,加入羊血或马血,使其含量为5%~10%;
(8)倾注于平皿内,使培养基厚度控制在5~6mm厚;
(9)置37℃烘干,备用。
【用途】
用作厌氧菌琼脂扩散法药敏试验。
【注意事项】
1.对于营养要求较特殊的产黑色素无芽孢厌氧杆菌及脆弱类杆菌等,要用冻融血琼脂平皿,并补充氯化血红素的含量,增加原含量的50%。
2.细菌暴露空气的时间,尽可能控制在20分钟以内,因该菌遇氧容易死亡。
3.生长较快的细菌菌量应控制在105~6CFU(Colony Forming Units)/ml;生长较慢的细菌菌量为108CFU/ml。
4.培养基要新鲜配制。
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