杨氏培养基

【原理】

  该基除兔血外，还添加了蛋白胨和葡萄糖等营养成分。葡萄糖是杜氏利什曼原虫前鞭毛体生长的重要能源，是经易化扩散机制进入虫体内，并通过糖酵解及磷酸葡萄糖支路代谢。

【成分】

  1.豆汤琼脂液：

  2.脱纤维兔血(制备同N.N.N培养基)。

【制法】

  (1)豆汤制作：将大豆浸泡12～14小时：期间更换几次水，去除豆皮，洗净后，加水1000ml，121℃灭菌30分钟，取出用纱布加滤纸分别过滤，并用蒸馏水补足1000ml；

  (2)立即加入蛋白胨、氯化钠溶解后调至pH7.2～7.4。再加入琼脂，溶解后121℃灭菌15分钟，保存备用；

  (3)用时将上述混合液融化后，取出若干ml，加入2%量的葡萄糖，加热使其充分溶解；

  (4)待溶液冷至70~80℃时，加入等量的脱纤维免血，充分混匀(勿使起泡)后，注入4ml于小平皿中，盖上皿盖，置冰箱备用；

  (5)为防止杂菌生长，每毫升免血中可加青霉素500u。

【用途】

  用于利什曼原虫前鞭毛体培养，可将患者骨穿刺液注入培养基内，置22~25℃温箱中培养，第5天可长出鞭毛体。以后培养基上发现的汗珠状小滴变为乳白色时，即为完好发育的证明。

【注意事项】

  1.在加脱纤维免血充分混匀时，勿使其起泡。

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