平皿(培养皿)在制备或使用过程中出现“缩边”现象(即培养基边缘收缩或脱离皿壁),可能由多种因素引起,以下是常见的因素:
一、培养基成分与浓度
1、琼脂浓度:琼脂含量过低(通常需要1.5%~2.0%)会导致凝胶强度不足,干燥时易收缩。
2、水份含量:培养基水份过多或干燥条件不当(如高温、通风过强)会加速边缘脱水收缩。
3、添加剂:某些成分(如高盐、高糖)可能改变培养基表面张力或凝固性。
二、倒皿操作影响
1、温度不当:培养基过热(>50℃)倒入可能导致皿壁预凝结,冷却后收缩。
2、不均匀分布:倒皿后未及时摇匀,边缘培养基过薄。
3、气泡干扰:倾倒培养基后,气泡在边缘积聚,干燥后形成缩边。
三、干燥与储备条件
1、快速干燥:未凝固完全时暴露于干燥环境(如超净台风量过大)。
2、储存温度波动:储藏培养基时温度发生剧烈波动或高温储存导致培养基变形。
四、解决方案
1、调整琼脂浓度,避免过度稀释;分装时控制培养基厚度(通常3~5mm)。
2、培养基冷却至约45~50℃(手感温热但不烫)时倒皿,并且倒皿后及时摇匀使分布均匀,并且避免剧烈晃动产生气泡。
3、倒皿后静置30分钟以上,确保完全凝固再移动,并且储存时密封并保持4℃恒温,避免湿度骤变。
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