【原理】
Diamond(1978)用酵母浸膏、铁、维生素B12、硫辛酸和吐温80取代了Panmede,发展为目前最新的TYI-S-33液体培养基。该基与其它培养所不同的是增加了外源性铁剂(枸橼酸铁胺)。适当添加外源性铁,有助于提高培养效果。
【成分及制法】
1. TYI肉汤:
混匀溶解后,用Whatman1号滤纸过滤,121C灭菌15分钟后,置冰箱内备用。
酪蛋白胰酶水解物
2.0g
酵母浸膏
1.0g
葡萄榶
1.0g
氯化钠
0.2g
磷酸氢二钾
0.1g
磷酸ニ氢钾
0.06g
半胱氨酸盐酸盐
0.1g
维生素C
0.02g
枸櫞酸铁胺
2.28g
蒸馏水
87.0ml
2. 维生素-Tween80混合液:
A液:维生素107液1000ml。
B液:维生素B1240mg溶解于1000ml双蒸水中。
C液:硫辛酸100mg溶解于100ml纯酒精中。
D液:Tween80 50g溶解于100ml纯酒精中。
上述4液按以下比例混合:
混匀后,用0.2μ微孔滤膜过滤除菌,分装于棕色瓶内,置-20℃处备用。
A液
1000ml
B液
12ml
C液
4mIl
D液
4ml
3.灭活牛血清:过滤除菌,56℃30分钟灭活,贮存-20℃备用。
4. TYI-S-33完全培养基:
混匀后,分装13ml于16mmX125mm试管中避光保存,置冰箱内备用。
TYI液
87.0ml
维生素-吐温80混合液
3.0ml
牛血清
10.0ml
【用途】
该基是目前较为理想的阿米巴培养基。转种时只需接种少量原虫,72小时后可增加100倍,明显高于以往培养基。Diamond用此基建立了多种阿米巴培养,其中13株痢疾阿米巴,2株类痢疾阿米巴和3株蛇阿米巴原虫等。
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