TTP-S双相培养基

【原理】

  1961年,Diamond用TTY-S-CEEM₂₅双相培养基首次建立阿米巴原虫的无菌培养。随后，培养基得到进一步改进和完善。TTP-S双相培养基是其中之一。该基以Panmede（一种牛肝消化质）代替酵母浸膏，用精制的离子琼脂代替普通琼脂，使固相斜面较清晰。待原虫生长适应后又可省去鸡胚浸膏。

【成分】

  TTP液:

【制法】

  (1)将上述成分混匀溶解后，用1NNaOH调至pH7. 0, 用Whatman1号滤纸过滤；

  (2)固体斜面制备：0.95g精制的离子琼脂2号加入80mITTP液中，加热溶解，乘热分装4.8ml于试管内,121℃灭菌15分钟。当冷却至50℃时，每管加入1.2ml马血清，制成斜面，贮存于冰箱内；

  (3)斜面覆盖液制备：将25mITTP液和0.02g精制的离子琼脂加入盛有75ml蒸馏水的烧瓶内,混匀后再同上法高压灭菌；

  (4)用前72~96小时，从冰箱内取出固体斜面培养管，每管加入5.7ml覆盖液,置35.5℃温箱内，临用时取出培养管，每管加入0.3ml维生素107液。该基经培养证明无菌便可应用。

【用途】

  用于痢疾阿米巴原虫的无菌培养。接种量、转种时间及清除细菌方法同前。用该基培养，在72小时内，原虫可增殖10倍，而用TTY-S-CEEM₂₅培养，只增殖3~4倍。

【注意事项】

  1.制作斜面时，应控制温度在50℃左右时加入马血清，过高温度可使营养成分破坏，过低时可使培养基在混匀前凝固。

  2.固体培养基加入覆盖液后，应置35.5℃温箱内72小时，只有这样，才使固体斜面中的蛋白质等营养成分渗透到覆盖液中。

上一篇：TP-S-1液体培养基

下一篇：没有了！