鸡胚浸膏(CEEM25)制备及维生素107液的配制

鸡胚浸膏(CEEM₂₅)制备

  (1)无菌取出第11到12天的鸡胚,去掉眼和嘴,称重，并切成2~3片备用。

  (2)将鸡胚速冻于干冰一乙醇浴中,1小时后取出,每g鸡胚加入3ml无菌缓冲液(氯化钠5.0g,磷酸二氢钾1.6g,磷酸氢二钠1. 6g,双蒸水1000ml,pH6.8),置冰箱内(3℃)浸泡96小时。

  (3)用干酪包布过滤,再将滤液离心30分钟(1000g，0℃),无菌收集上层液，分装10ml于带盖试管内，贮存于-22℃处备用。

鸡胚浸膏(CEEM₂₅)的制备：

  鸡胚经速冻1小时后，加入煮沸的缓冲液(加量同上)于鸡胚上,再煮拂2分钟,冷却后置冰箱内浸24小时。以后步骤同上。

维生素107液的配制

(1)水溶性B族维生素液：

  A液:

  B液:

  C液:

  将25mg维生素B₂加入到75ml蒸馏水中,滴加0.1NNaOH至该液完全溶解止，再加蒸馏水到100ml。

  将 A、B、C三液混合,加蒸馏水到500ml。

(2)生物素液：

  将30μgD-生物素加入200ml蒸馏水中,滴加0.1NNaOH使其溶解,再加蒸馏水到300ml。

(3)叶酸液：

  将30mg叶酸加入200ml蒸馏水中,滴加0.1NNaOH,使其溶解,加蒸馏水到300ml。

(4)脂溶性维生素A、D、K液：

  A液:将300mg维生素D₂溶解于63ml95%(V/V)乙醇中,再加入300mg维生素A使其溶解。

  B液:将60μg维生素Ｋ溶解于300mI5%(V/V)吐温80水溶液中。

  将A、B二液混合,加蒸馏水到3000ml。

(5)维生素E液:将25mg维生素E溶解于250ml蒸馏水中。

  上述5种溶液按以下比例混合，

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