罗克氏-鸡蛋-血清培养基(LES)

【原理】

  1925年Boeck和Drbohlar用LES培养基首先建立了痢疾阿米巴的体外培养，为阿米巴的实验诊断和生理生化研究创造了条件。该基中血清和鸡蛋为阿米巴原虫体外生长提供蛋白质和核酸前体等营养成分。罗克氏液对维持培养基的渗透压起重要作用。其中的无机盐类和葡萄糖亦是原虫生长所需要的物质。此外，与细菌并存生长，阿米巴可从细菌代谢中获得营养和生长条件。

【成分】

【制法】

  (1) 清洗鸡蛋外壳，并用70%酒精擦拭消毒后，打入盛有玻璃珠的消毒瓶内，摇匀，用纱布过滤。操作需无菌；

  (2) 注入50ml罗克氏液，摇匀。将此液分装于消毒试管内，每管5ml；

  (3) 将试管斜放在血清凝固器内, 加温3次,每天1次，第1次70℃，第2次80℃，第3次85℃，每次1小时,每次加温消毒后均置于冰箱中冷藏；

  (4) 接种前，每管加入由8份消毒罗克氏液(pH7.2~7. 4)与1份灭活血清(牛、马、兔或人血清均可)的混合液2ml和少许米粉，用橡皮塞封盖。

【用途】

  主要用于痢疾阿米巴原虫的培养。因该基配制简单易行，到今仍有人采用。亦可用于临床上诊断痢疾阿米巴病，其检出率比浓集法和直接涂片法均高。

【注意事项】

  1.制成的培养基需置温箱内培养24～48小时，证明无菌便可使用。

  2.为避免杂菌过度繁殖，可加青霉素于罗克氏液与血清的混合液内，每ml加1000u。

罗克氏液配制：

米粉制法：

  用研钵将大米碾成粉末,再加水细碾,烘干后装入消毒瓶内,置70℃烤箱中消毒3次，每次半小时。

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