胱氨酸(Cystine)和半胱氨酸(Cysteine)是含硫氨基酸,在培养基中主要通过提供硫源、调节氧化还原状态、参与代谢等方式发挥作用,尤其在微生物(如细菌、真菌)和细胞培养中应用广泛。以下是两者的具体作用及差异:
一、共性作用:硫源与代谢支持
1. 提供必需硫元素
作用:硫是微生物合成蛋白质、辅酶(如辅酶A)、维生素(如生物素)及含硫代谢产物(如某些抗生素)的必需元素。
机制:半胱氨酸:可直接被微生物吸收,其硫基(-SH)参与含硫化合物的合成。胱氨酸:需先被微生物分泌的胱氨酸酶水解为2分子半胱氨酸后才能被利用。
适用场景:缺乏合成含硫氨基酸能力的微生物(如某些乳酸菌、支原体)需在培养基中额外添加。
2. 参与能量代谢与氧化还原平衡
硫代谢途径:部分微生物(如脱硫弧菌)可通过分解胱氨酸/半胱氨酸获取能量,同时产生硫化氢(H₂S)。
调节细胞内氧化还原状态:两者的巯基(-SH)可作为细胞内天然抗氧化剂(如参与谷胱甘肽循环),清除活性氧(ROS),保护细胞免受氧化损伤。
二、半胱氨酸的独特作用:强还原性与特殊需求
1. 作为还原剂,降低培养基氧化还原电位
原理:半胱氨酸的巯基(-SH)具有强还原性,可直接与氧气反应生成胱氨酸(-S-S-),从而降低培养基的氧化还原电位(Eh),营造微氧或厌氧环境。
应用场景:厌氧菌培养:如用于双歧杆菌、拟杆菌的培养基(如改良MRS培养基);对氧化敏感的微生物:如流感嗜血杆菌(需X因子和V因子,同时需低氧化环境)。
2. 满足特殊营养需求
必需氨基酸:某些微生物(如衣原体、立克次氏体)无法合成半胱氨酸,必须从培养基中获取。
哺乳动物细胞培养:在动物细胞培养基(如DMEM、RPMI 1640)中,半胱氨酸是必需氨基酸,因细胞内合成能力有限,需外源补充。
三、胱氨酸的独特作用:稳定性与缓慢释放
1. 稳定性高,适用于需长期维持硫源的场景
化学特性:胱氨酸的二硫键(-S-S-)结构使其在中性或碱性培养基中更稳定,不易被氧化,可作为长效硫源缓慢释放。
应用场景:真菌培养:如用于青霉菌、酵母菌的合成培养基(如察氏培养基改良版),避免半胱氨酸快速氧化失效;需控制硫源释放速度的实验:如研究微生物对硫源的利用动力学。
2. 降低培养基毒性风险
对比半胱氨酸:半胱氨酸的巯基易与重金属离子(如Cu²+、Hg²+)结合产生毒性,而胱氨酸因无游离巯基,毒性较低,适用于含金属离子的培养基(如某些抗生素筛选培养基)。
四、关键区别与选择
表1 关键区别与选择
特性 |
半胱氨酸 |
胱氨酸 |
溶解性 |
易溶于水(尤其酸性条件) |
微溶于水(需用盐酸或氢氧化钠助溶) |
氧化还原能力 |
强还原性 (需氧条件下易被氧化为胱氨酸) |
弱还原性 (需先还原为半胱氨酸才具活性) |
适用微生物 |
厌氧菌、需快速利用硫源的微生物、动物细胞 |
真菌、需缓慢释放硫源的微生物、对巯基敏感的微生物 |
添加浓度 |
通常0.01%~0.1%(w/v) |
通常0.005%~0.05%(w/v) |
五、注意事项
1. 灭菌方式:半胱氨酸易受热氧化,需过滤灭菌(0.22 μm滤膜)后再加入到灭菌培养基;胱氨酸可耐受湿热灭菌(121℃,15 min),但酸性条件下可能水解,需调节pH后灭菌。
2. 配伍禁忌:避免与强氧化剂(如过氧化氢)、重金属盐类同时使用,以免巯基失活或产生沉淀。
3. pH影响:半胱氨酸在碱性条件下更易氧化,需控制培养基pH在5.5~7.5之间;胱氨酸在酸性条件下溶解度更高(如用盐酸溶解)。
六、总结
1. 半胱氨酸:以强还原性和快速利用性为核心优势,适用于需营造低氧化环境或快速补充硫源的场景(如厌氧菌、动物细胞培养)。
2. 胱氨酸:以稳定性和缓慢释放硫源为特点,适用于真菌培养、长效硫源需求或对巯基敏感的体系。
3. 两者在培养基中可互补使用(如同时添加以平衡还原速度与硫源供应),具体需根据目标微生物的代谢特性、实验条件及培养基配方优化选择。
七、产品展示
我公司有多种含胱氨酸和半胱氨酸的培养基,客户可根据实际应用情况和用途进行选用。
表2 部分产品信息
产品货号 |
产品名称 |
成分 |
规格 |
用途 |
HB5190 |
L-胱氨酸 |
250g/瓶 |
用于药品、生物制品无菌检测,检测好氧菌和厌氧菌(GB标准) |
|
HB0309 |
L-胱氨酸 |
250g/瓶 |
用于厌氧菌的分离培养 |
|
HB5190-9 |
L-胱氨酸 |
250g/瓶 |
用于药品、生物制品的无菌检测,检测好氧菌和厌氧菌 |
|
HB0310 |
L-胱氨酸盐酸盐 |
250g/瓶 |
用于厌氧菌的分离培养 |
|
HB0387 |
L-半胱氨酸盐酸盐 |
250g/瓶 |
用于啤酒中厌氧菌检测 |
|
HB8655 |
L-半胱氨酸盐酸盐 |
250g/瓶 |
用于亚硫酸盐还原厌氧菌孢子的增菌培养 |
|
HB0384-111 |
L-半胱氨酸盐酸盐 |
250g/瓶 |
用于食品中双歧杆菌的分离培养或计数 |
|
HB8493-1 |
L-半胱氨酸盐酸盐 |
250g/瓶 |
用于军团菌的分离培养(ISO标准) |
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HB8470 |
L-半胱氨酸 |
250g/瓶 |
用于厌氧菌增菌培养 |
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HB8594 |
L-胱氨酸 L-半胱氨酸盐酸盐 |
250g/瓶 |
用于绝对厌氧菌计数 |
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HB8518-1 |
L-半胱氨酸 |
250g/瓶 |
用于厌氧菌的培养 |
|
HB9203 |
L-半胱氨酸盐酸盐 |
250g/瓶 |
用于厌氧菌培养 |
注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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