一、用途及检验原理:
该培养基用于空肠弯曲菌选择性增菌培养。
动物组织酶解物和乳白蛋白水解物、酵母浸粉提供微生物生长所需的碳源、氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持渗透压;α-酮戊二酸提供生长因子,促进空肠弯曲菌的生长;丙酮酸钠和偏亚硫酸氢钠能中和培养基的有毒物质,也能增强菌的耐氧性,有助于未死受损细菌细胞的复苏;碳酸钠提供空肠弯曲菌最有利的pH生长环境;添加剂中,头孢哌酮和多黏菌素B抑制革兰氏阴性菌,万古霉素和三甲氧苄胺嘧啶乳酸盐抑制革兰氏阳性菌,两性霉素B抑制酵母、霉菌的生长;氯化血红素、裂解脱纤维羊或马血可为空肠弯曲菌的生长提供特殊的营养物质。
添加剂:每瓶需配套添加9盒HB0273-2a波尔顿选择性肉汤添加剂使用。
二、培养基配方(g/L):
动物组织酶解物 |
10.0 |
乳白蛋白水解物 |
5.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
氯化钠 |
5.0 |
α-酮戊二酸 |
1.0 |
丙酮酸钠 |
0.5 |
偏亚硫酸氢钠 |
0.5 |
碳酸钠 |
0.6 |
氯化血红素 |
0.01 |
pH值7.4±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品27.6g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min,冷至45℃-50℃时,每瓶培养基中加入12.25mL无菌裂解脱纤维羊或马血和1支添加剂,混匀,备用。注:培养基高压灭菌后有一些小黑色颗粒。
2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液,吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基和HBPM0124-15哥伦比亚血琼脂平板、参比培养基(HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂(TSA))。
3. 放置于恒温培养箱42℃±1℃微需氧培养24h-48h,观察试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置42℃±1℃微需氧培养24h-48h,试验结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
空肠弯曲杆菌 |
ATCC 33291 |
10-100 |
+++ |
生长良好 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
- |
抑制 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
100-1000 |
- |
抑制 |
接种量计数结果
波尔顿选择性肉汤培养基
图1 质控菌株在波尔顿选择性肉汤培养基中的生长情况
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