抗白念珠菌荧光抗体

【原理】

  免疫荧光技术是具有免疫学特性的荧光染色方法，是用荧光素与抗体蛋白质结合制成的荧光抗体，即保留色素的荧光特性，又能保持抗体的免疫学活性。用荧光抗体染色时，由于抗体与相对应的抗原发生特异性反应，在荧光显微镜下，荧光抗体上的荧光色素被激发出强烈的荧光，从而显示出抗原的形态。用此法鉴定真菌比常规培养敏感，快速和特异性高。

【制法】

  制备兔抗白念珠菌荧光抗体，首先制备抗原，以白念珠菌的混悬液（5X10⁷/ml)煮沸灭菌后免疫家兔，然后分离抗血清，提纯IgG，结合荧光素（异硫氰基荧光黄），经鉴定合格后放冰箱备用。

【用途】

  快速检定白色念珠菌*。

*染色步骤：

1.直接染色法:

  待检物涂片，固定，加兔抗白念珠菌荧光抗体,置湿盒37℃温箱30分钟，用自来水漂洗5分钟,待干镜检。如在荧光显微镜下查见带荧光的念珠菌孢子及菌丝即为阳性。

2.间接荧光抗体染色:

  标本涂片，固定，加兔抗白念珠菌血清，置湿盒内37℃温箱30分钟，用自来水漂洗5分钟待干，加羊抗兔荧光抗体放湿盒37℃30分钟，漂洗5分钟，待干镜检。

3.荧光菌团法:

  该法比直接染色快速，30分钟可出结果。取待检标本离心后、留下沉淀物加兔抗白念珠菌荧光抗体，离心弃上清，将沉淀物倒于玻片上，荧光显微镜检查，可见带荧光之菌团，高倍镜下可见带荧光的菌体。

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