一、大肠埃希氏菌O157简介
大肠埃希氏菌O157是一类能引起肠出血的致病性大肠埃希氏菌,又被称为肠出血性大肠埃希氏菌,存在多种血清型,与普通的大肠埃希氏菌生化存在一定差异,其山梨醇通常为阴性(普通大肠埃希氏菌通常为阳性),因此常用山梨醇麦康凯琼脂进行分离。
二、大肠埃希氏菌O157的分离
1.增菌:通常使用添加新生霉素的改良EC肉汤进行选择性增菌培养。
2.改良山梨醇麦康凯琼脂:利用大多数O157菌不发酵山梨醇的特定,可以使用山梨醇麦康凯琼脂或改良山梨醇麦康凯琼脂将大肠埃希氏菌O157与普通大肠埃希氏菌进行区分,大肠埃希氏菌O157菌落通常呈无色或灰褐色,而普通的大肠杆菌则由于分解山梨醇产酸,菌落通常为红色,一些其他可发酵山梨醇的肠道菌菌落也为红色。
3.O157菌显色培养基:利用O157菌产生的特异性酶,分解特定的底物显出不同的颜色进行区分,比山梨醇麦康凯琼脂具有更高的特异性和选择性。
三、大肠埃希氏菌O157的鉴定
1.生化鉴定
项目 |
O157菌 |
普通大肠埃希氏菌 |
三糖铁琼脂 |
A/A,不产硫化氢 |
A/A,不产硫化氢 |
山梨醇 |
阴性或迟缓阳性 |
+ |
靛基质 |
+ |
+ |
MR |
+ |
+ |
V-P |
- |
- |
氧化酶 |
- |
- |
西蒙氏柠檬酸盐 |
- |
- |
赖氨酸脱羧酶 |
+ |
+ |
鸟氨酸脱羧酶 |
+ |
+ |
纤维二糖 |
- |
- |
棉子糖 |
+ |
+/- |
MUG |
- |
+ |
动力 |
+/- |
多数+ |
2.毒力基因测定:O157菌通常具有产志贺毒素基因,可通过基因探针或PCR方法进行确认,也可通过接种细胞观察病变确认。
3.血清学试验:可通过O157和H7血清进行确认。若H7血清不凝集,则可能为无动力菌株,需对动力试验进行确认。
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