【原理】
真菌细胞壁富有多糖,经铬酸氧化后释出醛基,使硝酸银还原成金属银,因而使真菌染为黑色。
【成分】
1.铬酸水溶液:
2.乌洛托品硝酸银液:
铬酸
5g
蒸馏水
100ml
5℅硝酸银
5ml
3%乌洛托品
100ml
【制法】
取50ml乌洛托品硝酸银液,加5%硼砂液4ml,蒸馏水50ml,将后两者混匀加乌洛托品硝酸银液即成染液。
【用途】
用于真菌鉴别染色。
染色步骤:
1.按常规切组织片;
2.脱蜡入水后,在5%铬酸水溶液内氧化1小时;
3.流水冲洗2~5分钟;
4.将切片放入10%亚硫酸氢钠水溶液1分钟,去除残留的铬酸;
5.自来水洗5分钟,再用蒸馏水洗3次;
6.将切片投入乌洛托品硝酸银染液中,在56℃温箱内染30~60分钟;
7.蒸馏水洗涤2~3次;
8.以0.1%氯化金水溶液调色5分钟,以去除非真菌之黑色基底;
9.蒸馏水冲洗;
10.放入2%硫代硫酸钠水溶液中2~3分钟,去除未还原的银;
11.自来水洗涤:
12.用苏木素-伊红淡染以显示组织结构,或用淡绿复染30~45分钟:
13.用95%酒精、纯酒精脱水2次,二甲苯清洗2~3次;
14.封固:
15.结果:真菌呈黑色。
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