【原理】
由于真菌细胞壁的多糖物质被过碘酸氧化而放出醛基,再和锡夫氏试剂中亚硫酸复红作用而显示红色。
【成分及制法】
1.碱性复红液:
2.焦亚硫酸钠液:
碱性复红
0.1g
95℅洒精
5ml
蒸馏水
95ml
3.复方碱性复红液Ⅰ
焦亚硫酸钠
1g
1N 盐酸
10ml
蒸馏水
190ml
碱性复红和蒸馏水加热至沸点,冷却后加入焦亚硫酸钾及盐酸,24小时后加入活性炭0.5g,振摇1分钟后过滤,直至滤液无色,置冰箱备用。
碱性复红
1g
蒸馏水
200ml
焦亚硫酸钾
2g
1N 盐酸
20ml
4.复方碱性复红液Ⅱ
碱性复红和蒸馏水加热煮沸,待冷却至50℃加入盐酸和焦亚硫酸钠,放暗处48小时,至溶液退色,存放冰箱备用。临用前先取数滴该液放40%甲醛液10ml中,如立即变红色可用,变为紫蓝色不能用。
碱性复红
1g
焦亚硫酸钠
1g
1N 盐酸
20ml
蒸馏水
200ml
【用途】
鉴别真菌染色。
染色步骤:
(一)用于直接涂片标本染色
1. 涂片待干,固定标本;
2. 浸入95%酒精1分钟;
3. 浸入5%过碘酸水溶液5分钟;
4. 自来水冲洗2分钟;
5. 浸入碱性复红液2分钟;
6. 自来水冲洗2分钟;
7. 浸焦亚硫酸钠液5分钟:
8. 每隔2分钟浸入70%、80%酒精各1次:
9. 浸入二甲苯2分钟;
10. 固定:
11.结果,真菌染成红色。
(二)用组织切片标本染色
1. 组织切片按常规处理;
2. 浸入0.5%过碘酸水溶液5分钟;
3. 蒸馏水冲洗;
4. 浸入复方碱性复红液(1)或(2)液内15分钟;
5. 自来水冲洗10分钟,至切片发红色;
6. 淡绿复染(淡绿0.2g、冰醋酸0.2ml、蒸馏水100ml);
7. 95%酒精脱水1次,纯酒精脱水2次:
8. 二甲苯洗2次:
9. 封固:
10. 结果:其菌染成红色,背景为淡绿色。
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