一、试验原理
用途:用于化妆品中菌落总数计数。
原理:蛋白胨、胰酪蛋白胨、牛肉浸粉和酵母浸粉提供细菌生长所需的碳源、氮源、维生素等营养元素;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供可发酵的碳源;卵磷脂和亚硫酸氢钠能中和防腐剂;琼脂作为凝固剂;吐温80用于中和防腐剂和表面活性剂。
二、培养基配方(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
胰酪蛋白胨 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
酵母浸粉 |
2.0 |
氯化钠 |
5.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
卵磷脂 |
1.0 |
亚硫酸氢钠 |
0.1 |
琼脂 |
20.0 |
pH值7.0±0.2(25℃) |
三、试验方法
1、称取本品52.1 g,另加入7.0 g吐温80,加热煮沸完全溶解于1000 mL蒸馏水或纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15 min,倾注无菌平板,备用。
2、以10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液,吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基和参比培养基(HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂(TSA))。
3、放置于35℃±2℃恒温培养箱中,需氧培养40 h-48 h,观察试验结果。
四、质控结果
接种以下质控菌株,放置35℃±2℃需氧培养40 h-48 h,试验结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控结果 |
生长情况 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
10-100 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
+++ |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
+++ |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
+++ |
铜绿假单胞菌 |
ATCC 27853 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
+++ |
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