一、试验原理:
用于副溶血性弧菌的甲基红和V-P试验。
䏡胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂;3%浓度的氯化钠适合弧菌生长。MR试验中,细菌分解葡萄糖产酸,滴入甲基红显红色,即为MR阳性。V-P试验中,细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,并使丙酮酸脱羧,生产中性的乙酰甲基甲醇,在碱性溶液中被空气氧化生成二乙酰,继续与培养基中的胍基反应生成红色化合物,即为V-P阳性。
二、培养基配方(g/L)
䏡胨 |
7.0 |
葡萄糖 |
5.0 |
磷酸氢二钾 |
5.0 |
氯化钠 |
30.0 |
pH 6.9±0.2 25℃ |
三、试验方法:
1. 将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液。
2. 吸取0.05ml菌悬液至生化管内,36±1℃培养48±2h后,观察试验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,36±1℃培养48±2h:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
产气克雷伯氏菌 |
ATCC 13048 |
+++ |
MR试验阴性,滴加MR试剂3滴培养基呈橙黄色 |
副溶血弧菌 |
ATCC 17802 |
+++ |
MR试验阳性,滴加MR试剂3滴培养基呈红色; V-P试验阴性,滴加0.6mL甲液及0.2mL乙液, 培养4h培养基不变色 |
溶藻弧菌 |
CMCC(B) 20100 |
+++ |
V-P试验阳性,滴加0.6mL甲液及0.2mL乙液, 培养4h培养基呈红色 |
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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