干燥培养基失效的主要因素

  在微生物实验中，干燥培养基（如粉末状琼脂、营养肉汤干粉）因其便于储存和运输而被广泛使用。它的核心成分包括：营养物质（如蛋白胨、牛肉膏）、凝固剂（如琼脂粉）和选择性添加剂（如抗生素、指示剂）等，这些成分在干燥状态下相对稳定，但若储存不当，仍会逐渐退化，最终导致培养基失效。

一、如何判断干燥培养基是否失效

  （1）物理检查。结块、变色、异味等都可能已变质。

  （2）性能验证

  无菌试验：配制后孵育48小时，应无污染。

  生长试验：接种标准菌株（如大肠杆菌ATCC 25922），观察生长是否正常。

二、失效的主要因素及预防措施

（1）潮湿

  干燥培养基吸潮后，水分会激活其中的化学成分（如蛋白胨水解、抗生素降解），还可能滋生霉菌。典型现象为结块、颜色变深、溶解后浑浊。

  预防措施：密封保存，加干燥剂。避免反复开盖（尤其是高湿度环境）。

（2）高温

  高温会加速蛋白质变性（如酶类失活）、琼脂水解（凝胶强度下降），以及抗生素失效。典型现象包括溶解后凝胶强度不足（培养基太软）或选择性培养基抑菌效果变差（如MAC培养基无法抑制杂菌）。

  预防措施：储存温度≤30℃，远离热源（如烘箱、阳光直射）。

（3）光照

  紫外线或强光会分解光敏感成分（如维生素B族、某些抗生素和指示剂）。典型现象包括显色培养基颜色异常（如EMB培养基变淡）或光依赖性抗生素失效（如四环素）等。

  预防措施：使用棕色瓶或避光袋包装。储存于暗柜中。

（4）长期储存

  即使理想条件下，培养基成分也会缓慢降解（如碳水化合物分解、琼脂聚合链断裂）。超过有效期后，微生物生长迟缓或菌落变小，pH也会改变。

  预防措施：遵循“先进先出”原则，避免囤积。

三、结论

  大部分干燥培养基最佳储存条件为4~30℃的相对湿度＜60%的密封避光防潮处。只有避开潮湿、高温、光照和时间的“四重攻击”，才能保证干燥培养基的最佳使用效果。

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