氯化钠浓度对金黄色葡萄球菌生长的影响

一、金黄色葡萄球菌简介

  金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S. aureus）是一种常见的条件致病菌，隶属葡萄球菌属，革兰氏阳性球菌，通常在血平板上可产生β溶血环，发酵甘露醇，在甘露醇氯化钠琼脂上通常为黄色菌落，大部分菌株可产生卵磷脂酶和脂肪酶，在卵黄琼脂上菌落周围形成乳浊环，在Baird-parker琼脂上形成双环。金黄色葡萄球菌是除芽孢菌以外抗逆性最强的菌种之一，生命力顽强，可耐受高盐环境，因此常用含高浓度氯化钠的7.5%氯化钠肉汤、10%氯化钠TSB、甘露醇高盐琼脂等培养基进行选择性增菌和分离培养。

二、试验过程

  以TSB为基础培养基（含0.5%氯化钠），分别加入不同浓度的氯化钠，制成含氯化钠浓度为2%-10%梯度的TSB培养基，向培养基中接种约10CFU的金黄色葡萄球菌（选用CMCC26003和ATCC25923进行测试），36±1℃培养至30h，每10min记录OD600值。

三、试验结果及分析

  试验结果表明，虽然金黄色葡萄球菌对高浓度氯化钠有较强的耐受性，可以生长，但生长速度明显随着氯化钠浓度的升高而降低。当菌的浓度低于10⁶CFU/mL时，OD值无法准确监测到，肉眼也难以观察到浑浊现象。在TSB培养过程中，培养至约12h，OD600达到0.04以上（肉眼可见轻微浑浊），而在7%-8%氯化钠TSB中，则需20-24h左右，在10%氯化钠TSB中则需26h以上（培养时间与初始浓度也有关系，初始浓度越大，则所需培养时间越短）。因此在进行金黄色葡萄球菌进行检验时，对于含菌量本身很低且杂菌很少的药品，通常使用TSB直接增菌，金黄色葡萄球菌可以很快生长繁殖，再进行划线分离培养。而对于污染程度稍高且可能存在较多杂菌的食品，则使用7.5%氯化钠肉汤进行选择性增菌培养，既能抑制较多杂菌的生长，又可以让金黄色葡萄球菌能够稍微快速生长繁殖。而对于污染较为严重的样品，则通常选用10%氯化钠TSB进行选择性增菌培养，有更强的抑制杂菌效果，同时由于本身可能含有更多的金黄色葡萄球菌，也能有较好的培养效果。

表1 金黄色葡萄球菌生长曲线

表2 金黄色葡萄球菌ATCC25923生长曲线

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